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编号:1412686
对新型冠状病毒肺炎康复期核酸检测阳性的认识
http://www.100md.com 2020年12月19日 空军军医大学学报 2020年第3期
纤毛,阴性,1核酸检测转阳的可能原因,1实时荧光逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,RT-PCR)检测技术因素,2康复期呼吸道纤毛柱状上皮细胞排
     裴银辉,张 杰(华北理工大学基础医学院,河北 唐山 0630;唐山弘慈医院综合内科,河北 唐山 06300)

    2019年12月,在武汉发现了由新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染的肺炎疫情,国务院随即将新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)纳入法定传染病。此次SARS-CoV-2是一种以前尚未在人类中发现的新型冠状病毒。2020年1月6日,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所成功自临床患者分离并培养出病毒,1月27日通过国家病原微生物资源库上传病毒电镜照片,随后发布了SARS-CoV-2核酸检测的引物序列和荧光探针[1]。此后,我国各版《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》中将核酸检测作为诊断和解除医学隔离的重要实验室指标[2]。但近段时间来,陆续有多个COVID-19患者治愈后康复期核酸检测转阳的报道[3],分析核酸转阳的可能原因及对策,可为后续《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》的修订及疫情防控决策提供参考。

    1 核酸检测转阳的可能原因

    1.1 实时荧光逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptasepolymerase chain reaction,RT-PCR)检测技术因素

    国家卫生健康委员会发布的各版《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》实验室诊断标准为咽拭子实时荧光RT-PCR核酸检测阳性,出院标准为连续2次(至少间隔24 h)呼吸道标本核酸检测阴性。SARS-CoV-2属套式病毒目(Nidovirales)冠状病毒科(Coronaviridae)中的冠状病毒属(Coronavirus)。实时荧光RT-PCR在PCR反应体系中加入荧光标记探针,选择针对冠状病毒属高度保守的开放读码框1ab(open reading frame 1ab,ORF1ab)和核壳蛋白(nucleoprotein,N)2个基因区域的引物扩增冠状病毒属特异核酸序列。

    Target 1(ORF):

    正向引物(F):CCCTGTGGGTTTTACACTTAA;反向引物(R):ACGATTGTGCATCAGCTGA;荧光探针(P):5'-FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGGBHQ1-3' ......

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