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编号:604893
外泌体分离检测方法的研究进展
http://www.100md.com 2022年10月12日 空军军医大学学报 2022年第5期
脂质,核酸,1外泌体的分离纯化,1离心,2沉淀法,3免疫亲和法,4基于尺寸的分离方法,2外泌体的检测,1核酸信息依赖性识别,2蛋白质识别,3脂质识别,4表面修饰识别,5整体识别,3结语
     王煜彤,侯诗源,吕云华,马瑞雪,刘梓谕,吴兴安,刘蓉蓉

    (空军军医大学基础医学院: 1学员二大队, 2微生物与病原生物学教研室,陕西 西安 710032)

    外泌体存在于各种体液中,如腹水、血液、脑脊液、泪液、尿液以及唾液等。外泌体携带大量胞内和胞外的生物信息,可作为细胞通讯和细胞外基质重塑的媒介,与人类健康和疾病息息相关[1]。因为外泌体可以携带源细胞和组织中的生理变化信息,所以也可作为诊断生物标志物[2]。随着对外泌体研究的不断深入,外泌体在临床诊断、疾病治疗、组织再生等方面显示出重要的研究价值[3]。外泌体形成始于细胞膜的内吞作用,包括受体介导的内吞作用、包涵体蛋白的核内吞作用和胞吐[4]。内吞后形成早期内体,晚期内体内陷导致腔内囊泡形成,多囊泡体通过细胞骨架和微管网络传输至细胞膜,通过胞吐作用释放成为外泌体。

    外泌体作为物质运输的载体,在细胞间通讯中起着至关重要的作用,反映了源细胞的状态和特征。外泌体大小各异,直径为30~200 nm,即使从同一个细胞系分泌出的外泌体,大小也有很大差异。外泌体具有单层膜结构,富含蛋白质、脂质等生物大分子。与其他囊泡不同,外泌体内含多种核酸,包括各种RNA、基因组DNA和线粒体DNA等,尤其富含多种小型非编码RNA 。这些包含在脂质双层结构中的遗传物质可以通过细胞的内吞途径融合于源细胞或在受体细胞之间进行转移。外泌体包含多种跨膜蛋白、脂锚定蛋白和可溶性蛋白等。其中四跨膜蛋白家族(CD81、CD82、CD37和CD63)在外泌体中高度富集,而不会出现在血浆中[5]。四跨膜蛋白家族自身不具有催化活性,但可以促进其他膜蛋白的运输[6]。

    外泌体的产生是细胞蛋白质质量控制机制之一,它使细胞能够快速、有选择性地将蛋白质从质膜上清除[7]。外泌体也是细胞外基质的组成成分之一,并且能通过细胞间的运输扮演信号转导和分子转运的角色。多项研究表明,外泌体可作为多种疾病的标志物,其蛋白质和核酸的含量在源细胞中处于稳定状态[8]。外泌体在不同的癌症亚型中均有表达,是一种潜在的肿瘤标志物[9]。此外,1型糖尿病患者的外泌体有望成为新的诊断指标和潜在治疗靶点[10]。外泌体在促进细胞运输系统的运行和调节机制方面的研究中也取得了很大的进展,对恶性肿瘤的免疫也有积极作用[11]。外泌体作为天然性转运载体,具有纳米级粒径及良好生物相容性,可以携带RNA、蛋白质及小分子药物,相比于传统的脂质体、微球等人工合成的药物载体,是一种很有前景的靶向递药载体[12]。由于外泌体的特征性识别、分离和定量检测在研究中非常关键 ......

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