模拟失重下EphrinB2/EphB4通路在共培养体系中血管平滑肌细胞增殖及凋亡中的作用
小室,1材料与方法,2方法,2结果,1模拟失重下对共培养的HASMCs中EphB4-EphrinB2的影响,2模拟失重下对共培养的HASMCs增殖的影响,3模拟失重48h
徐 萌,李程飞,潘益凯,李 曦,铁娅滕,赵星成,范洁怡,王永春(空军军医大学航空航天医学系航空航天医学训练教研室,陕西 西安 710032)
随着载人航天事业的不断发展,失重所致的航天员心血管功能失调严重威胁航天员的健康以及任务的完成[1-3]。经航天医学实践证明,心血管系统对机械应力高度敏感,在失重或模拟失重环境下,会随着重力的变化而发生形态和功能变化,主要表现为飞行后立位耐力不良[4],这是由于微重力环境造成的体液转移,使得机体上下半身不同部位血管所受到的跨壁压和剪切力发生了变化[5]。促红细胞生成素肝细胞激酶受体及其配体肝配蛋白(Ephrin)是酪氨酸激酶家族的最大成员,统称为Eph家族蛋白[6-9],Eph/Ephrin是体内重要的信号通路,在治疗心肌梗死、高血压以及调控血管新生和血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)生长中具有重要作用[10-12]。根据GALE等[13]的研究,一些Eph和Ephrin在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中表达,并在VSMCs增殖及迁移中发挥作用。现有研究证明,从EphrinBs到EphB4的信号传导(正向信号传导)和从EphB4到EphrinB2的信号传导(反向信号传导)都可以调节VSMCs的收缩性[14]。国内外研究均表明,VECs与VSMCs作为血管壁的主要结构细胞[15-19],其产生和分泌的生物活性物质在调节血管张力、调节血压、抗血栓形成等方面发挥着重要作用[20]。也有研究表明,在失重/模拟失重环境下可致VECs与VSMCs的形态、功能、结构及基因表达等发生改变[21]。然而,以往的诸如此类研究仅局限于模拟失重下单独培养内皮细胞或单独培养平滑肌细胞的作用机制研究,而在模拟失重环境下两种细胞的相互调节作用研究则屈指可数。本研究以体外共培养的人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)与人主动脉平滑肌细胞(human aortic smooth muscle cells,HASMCs)为研究对象,通过细胞回转器模拟失重环境,检测VSMCs中Eph相关分子、α- 平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma 2, Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X, Bax)与正常组有无差异表达 ......
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