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编号:604776
+15 Gz重复暴露状态小鼠骨髓间充质干细胞转录组分析
http://www.100md.com 2023年2月8日 空军军医大学学报 2023年第1期
差异基因,成骨,飞行员,1材料与方法,2方法,2结果,1小鼠BMSCs的分离培养与鉴定,2+15Gz暴露小鼠BMSCs差异基因的筛选及聚类分析,3+15Gz暴露小鼠BMSCs差异基因的GO富集分析,4+1
     王亚珍,傅昭粤,沈娱汀,李 娟,侯永利,马千里,方 亮,陈丽华

    (空军军医大学基础医学院免疫学教研室,陕西 西安 710032)

    高性能飞机在执行飞行任务时往往会产生反复出现的正加速度(positive acceleration,+Gz),使飞行员处于+Gz重复暴露状态[1],长期的+Gz暴露会对飞行员的心血管系统、神经系统和骨骼肌肉系统产生影响,使飞行员面临因心脑功能损伤、脊柱损伤、颈椎腰椎和骨关节退行性变所导致的永久性飞行任务限制[2-7],严重威胁飞行员的健康和职业生涯。为提高飞行员对+Gz的耐受能力,减轻+Gz重复暴露对飞行员所造成的损伤,科学家们进行了大量研究。如有研究表明,适当的+Gz重复暴露训练可显著增加飞行员的心血管功能储备,提高其对+Gz的抗荷能力[8];同时,也有研究表明,低+Gz预适应可显著减轻高+Gz重复暴露导致的脑皮质和神经元的损伤,改善高+Gz暴露引起的学习记忆功能障碍[9];适当时间和强度的+Gz暴露可促使骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化增殖,促进机体的成骨[10-11];+Gz促进BMSCs表达多种参与成骨分化相关基因,如ALPL、RUNX2和BMP2等,促进BMSCs向成骨细胞分化[12];但关于+Gz影响BMSCs整体转录组状态的研究并不多见。鉴于此,本研究将在+15 Gz重复暴露状态下的小鼠作为研究对象,探索不同暴露时间小鼠BMSCs的整体转录组变化情况,并初步分析成骨分化相关基因的表达变化情况。本研究为进一步探索高+Gz影响BMSCs成骨的机制研究打下基础,也为适当+Gz暴露训练增强成骨、改善机体对压力负荷的承受能力提供一定的参考数据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    20只6~8周龄雄性C57BL/6小鼠,饲养条件为SPF级,平均体质量为20 g,购自空军军医大学实验动物中心。将小鼠随机分为4组:①+15 Gz暴露1周组(+15 Gz,15 min/d,连续离心1周);② 1周对照组(0 Gz,15 min/d,连续处理1周);③+15 Gz暴露3周组(+15 Gz,15 min/d,连续离心3周);④ 3周对照组(0 Gz,15 min/d,连续处理3周),每组5只。其中,在+15 Gz暴露1周组和1周对照组的小鼠中随机选取3只小鼠、+15 Gz暴露3周组和3周对照组中随机选取2只小鼠提取BMSCs用于转录组测序。本实验经空军军医大学实验动物福利与伦理委员会审批通过(许可证号:20180101) ......

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