傅昭粤，沈娱汀，李 娟，王 宁，方 亮，陈丽华

    (空军军医大学基础医学院免疫学教研室，陕西 西安 710032)

    战斗机在高速飞行过程中，由于飞行速度和方向发生改变，会产生加速度作用。如飞机俯冲改出时，飞行员可受到由足向头的持续性正加速度(positive acceleration，+Gz)作用[1-2]。现代战斗机在飞行过程中能产生持续时间长达45 s，以及高达6 G/s的加速度增长率，在此作用下飞行员会受到高达+9 Gz的重复暴露[3-5]。因此，随着现代高性能战斗机的列装，航空环境对飞行员的影响不容小觑，其持续性+Gz所引起的应激会导致飞行员身体机能和作业效能发生不同程度的变化[6-8]。在高+Gz的作用下，飞行员的免疫系统也会发生许多变化。既往研究发现，在+Gz作用下，CD4+T细胞亚群比例会发生改变[9]，提示+Gz可能会影响免疫系统的稳态[10-11]。CD4+T细胞是一个异质性群体，根据其细胞膜标记分子、分泌的细胞因子、表达的转录因子和功能的不同可分为Th1、Th2、Th9、Th17、滤泡辅助性T细胞和调节性T(regulatory T, Treg)细胞等亚群[12]。既往关于+Gz对CD4+T细胞影响的研究并不多见[13]，关于高+Gz暴露对Treg细胞影响的研究更是少有报道。

    鉴于此，本研究在成功建立+15 Gz重复暴露7 d小鼠模型的基础上，初步探讨高+Gz重复暴露下小鼠免疫系统中CD4+T细胞和Treg细胞的变化，为后续进一步深入研究打下基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    实验选用10只6～8周龄C57BL/6雄性小鼠，平均体质量为20 g，均为SPF级。将小鼠随机分为+15 Gz组(+15 Gz，15 min/d，7 d)和对照组(0 Gz，15 min/d，7 d)，每组5只。本实验经空军军医大学实验动物福利与伦理委员会审批通过(许可证号：20180101)。

    1.2 方法

    1.2.1 +Gz暴露 通过动物离心机构建+15 Gz重复暴露7 d小鼠模型[14]。通过小鼠固定器将小鼠水平固定于离心机的转臂上，头部面向离心机转臂轴心。+15 Gz组小鼠重复暴露于+15 Gz，15 min/d(峰值作用时间)，共持续7 d。对照组小鼠仅放置于固定器中，不进行+Gz暴露。小鼠重复暴露7 d后，进行后续实验。

    1.2.2 脾脏细胞的提取及单细胞悬液的制备 45 mg/kg戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠后 ......