吴菲菲，黄云强，夏雨露，刘勃志，张昆龙，郑 杰，拜云虎，朱昌磊，杨雁灵，王亚云(空军军医大学：基础医学院教学实验中心，西京医院康复理疗科，西京医院肝胆胰脾外科，陕西 西安 700)

    近20年来，神经病理性痛(neuropathic pain，NP)已成为最常见和最严重的临床慢性症状[1]。一项流行病学研究揭示NP的患病率为6.9%～10.0%，并呈逐年上升趋势[2]，严重影响了患者的生活质量。NP发病机制复杂，治疗效果较差，发病机制尚未完全阐明。目前临床治疗中使用的阿片类药物和非甾体抗炎药仅对少数患者有效，因此，进一步研究其发生发展机制对于研发新的治疗药物，改善临床治疗效果具有重要意义。脊髓背角作为疼痛信息整合的初级中枢，外周损伤可能引起抑制性背角神经元的功能障碍，导致投射神经元的敏化和兴奋性的增加[3]，可作为研究NP的主要突破口。

    线粒体作为中枢神经系统供能的重要细胞器[4]，在疼痛的发生发展中发挥重要作用。线粒体解偶联蛋白4(uncoupling protein 4，UCP4)定位于线粒体内膜，是一种介导H+内流的跨膜蛋白质，介导质子重新进入线粒体基质，使得流经ATP合酶的质子减少，进而降低合成ATP的驱动力，即形成“质子漏”[5]。作者前期研究发现，NP状态下脊髓背角UCP4表达量降低，提示UCP4可能参与NP的中枢敏化过程并发挥重要作用[6]，但是其镇痛作用和机制不清。本文在此基础上进行深入研究，旨在阐明UCP4参与NP中枢敏化过程的机制。首先使用立体定位仪在脊髓背角注射病毒，靶向调控脊髓背角UCP4的表达，然后构建坐骨神经选择性损伤(spared nerve injury，SNI)模型，模拟NP，通过检测机械性痛敏、热痛敏、线粒体超微结构、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential，MMP)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)及腺苷三磷酸(adenosine triphosphate，ATP)含量等指标变化，阐明UCP4参与NP的作用机制，为研究NP提供新的分子靶标，为治疗NP和开发镇痛新药提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    采用8～10周龄的健康雄性C57BL/6J小鼠45只，体质量20～25 g，由空军军医大学实验动物中心提供。本实验全部方法和操作遵守国际疼痛研究协会指南进行。RNA提取试剂盒(DP451)购自天根生化科技(北京)有限公司；MMP检测试剂盒(C2006)、SOD检测试剂盒(S0101S)、总谷胱甘肽检测试剂盒(S0052)均购自上海碧云天生物技术有限公司；UCP4的AAV病毒购自和元生物技术(上海)股份有限公司 ......