可注射浓缩生长因子凝胶在恒牙牙髓再生中应用的实验研究
细胞层,比格,箭头,1材料与方法,2方法,2结果,1可注射CGF凝胶的外观,2比格犬根尖情况及牙髓再生的组织学观察,3讨论
王明浩,郭 倩,张轶丹,朱小苗,蒋文凯,王胜朝,何文喜(口颌系统重建与再生全国重点实验室,国家口腔疾病临床医学研究中心,陕西省口腔医学重点实验室,空军军医大学口腔医院牙体牙髓病科,陕西 西安 7003;空军特色医学中心口腔科,北京 004)牙体牙髓病是一类不可逆性牙体组织疾病,病变波及牙髓时可能引发牙髓炎症,继而导致感染坏死,给患者带来极大的疼痛感,影响生活质量。目前临床治疗中对于不可复性牙髓炎和根尖周炎仍以根管治疗为主要手段,经过机械性根管预备后,根管壁变薄,根折风险变大[1-2],同时,由于治疗过程中患牙牙髓被完全拔除,牙齿失去了牙髓的营养功能[3-4],更加大了这一风险。
基于干细胞、支架材料和生长因子的牙髓再生是目前组织工程领域的研究热点之一。在早期探索中,研究者通过血运重建的方法诱导牙髓再生[5-6],但根管钙化阻塞是导致其失败的重要原因之一。近年来,许多研究尝试通过牙髓干细胞直接移植诱导牙髓再生[7-12],并在乳牙牙髓再生中取得了较好的效果[8,12],但移植牙髓干细胞对恒牙牙髓再生的效果并不理想[7,9-11]。同时,尽管牙髓干细胞是较易获得的干细胞来源,但在实际的临床应用中仍存在体外培养及干细胞来源的伦理问题。因此,仅通过移植支架材料和生长因子诱导牙髓再生的细胞归巢方法成为了新的研究热点,并有研究证明细胞归巢诱导牙髓再生具有可行性[13-14]。
浓缩生长因子(concentrated growth factors,CGF)是第三代自体血小板凝聚物,由外周血变速离心获得,血液中的纤维成分和生长因子在离心后位于离心管的上清液层,富集的纤维成分成为牙髓再生的天然支架,其对生长因子的储留可以起到缓释生长因子的作用。本研究中所使用的CGF为可注射的液态凝胶,同时添加了离心后血细胞层与上清液层之间少量的CD34+细胞,具有促进组织再血管化的作用,而新生血管的长入更有利于组织再生[15-17]。
本研究通过采集比格犬自体外周静脉血制备可注射CGF凝胶,将其应用于犬恒牙牙髓再生,既保留了CGF作为牙髓再生天然支架、缓释生长因子的作用,又简化了牙髓再生的操作。同时,CGF的应用与根尖引血联合,探索在恒牙牙髓再生中新生组织矿化与牙髓样组织再生之间的平衡。
1 材料与方法
1.1 材料
iRoot-BP Plus(IBIOCERAMIX,加拿大);流动树脂(3M,美国);HE染色试剂盒(碧云天,中国)。根管预备机(啄木鸟,中国);CGF离心机(Silfradent ......
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