司佳麟，张耀元，康晓宁，吴 悠，马宁灿，禹 卓，黄 静，吴礼安 (口颌系统重建与再生全国重点实验室，国家口腔疾病临床医学研究中心，空军军医大学口腔医院儿童口腔科，空军军医大学基础医学院学员队，空军军医大学基础医学院神经生物学教研室，陕西 西安 700)

    急性牙髓炎因发病率高、疼痛剧烈而成为全社会关注的热点。患者常表现为剧烈且持续的冷热刺激痛、自发痛和牵涉痛等，甚至出现焦虑、抑郁等情绪障碍，严重危害了身心健康及生活质量[1-2]。牙髓炎疼痛伴发焦虑的机制复杂且少被关注，临床更多地关注疼痛本身而忽略伴发的焦虑情绪，这使患者不仅忍受疼痛的折磨，并且承受焦虑情绪的困扰[3]。因此，探索牙髓炎疼痛及伴发焦虑的机制对牙髓炎疼痛及伴发焦虑的治疗具有重要意义。

    口面部主要由三叉神经的初级传入神经纤维支配，大部分初级传入神经的胞体位于三叉神经节内，进而向中枢神经系统传递感觉信号[4]。有关牙髓炎疼痛发病机制的研究目前多集中在牙髓神经纤维和三叉神经节等区域，而中枢部位的机制却鲜有报道，关于牙髓炎伴发焦虑样情绪的机制研究则更少。岛叶(insular cortex，IC)和内侧前额叶皮层(medial prefrontal cortex，mPFC)参与痛觉和焦虑样情绪的发生发展[5-7]。其中，IC在疼痛感知和情绪调节中起着至关重要的作用[7-8]，有文献报道，三叉神经的眶下神经损伤引起颌面部疼痛伴发焦虑情绪时，IC被激活。mPFC是边缘系统的重要结构，参与对工作记忆、学习、注意力及疼痛感觉和情感的处理[9-10]。IC和mPFC内有兴奋性神经元和抑制性神经元，作为中枢神经系统中重要的抑制类神经元，γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)能神经元是神经系统兴奋抑制平衡的重要调控因素[11]。研究表明，IC和mPFC中GABA能神经元的激活与疼痛程度和焦虑情绪相关[12-14]。然而，mPFC和IC及其内的GABA能神经元是否参与牙髓炎疼痛和伴发焦虑的调控尚不清楚。

    针对上述问题，本研究构建了小鼠实验性牙髓炎模型，在不同时间点进行痛行为学检测，并运用旷场和高架十字迷宫实验检测牙髓炎小鼠是否伴发焦虑样行为。进一步利用该模型和免疫荧光染色技术，观察了在牙髓炎疼痛状态下，IC和mPFC脑区内神经元的激活情况及GABA能神经元的活性变化，为IC和mPFC内GABA能神经元参与牙髓炎疼痛及伴发焦虑样行为的调控提供形态学证据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 C57BL/6小鼠(雄性 ......