过忠杰，张 蓉，赵 玫，张邵华，刘 伟，李穆琼，姜 茹，王胜正

    [1空军军医大学药学系药物化学与药物分析学教研室，陕西 西安 710032；2陕西科技大学食品科学与工程学院(生物与医药学院)药学系，陕西 西安 710021]

    近些年，深部真菌感染已成为艾滋病和肿瘤等重大疾病死亡的主要原因[1-2]。而对于深部真菌感染，临床上安全有效的抗真菌药物数量有限，主要有多烯类(如两性霉素B)、氟代嘧啶类(如5-氟胞嘧啶)、唑类[如氟康唑(fluconazole，FLC)和伊曲康唑]、棘白菌素类(如卡泊芬净和米卡芬净)等[3-4]。两性霉素B被誉为抗真菌治疗的“金标准”，但长期使用易产生严重的肾毒性和溶血反应[5]。5-氟胞嘧啶的抗真菌谱较窄，常用于联合用药。FLC对曲霉菌感染无效，仅具有抑菌作用，长期反复使用易产生快速耐药性[6-7]。棘白菌素类对一些新型的致病真菌(如连孢菌和接合菌)无效，并且只能静脉给药[4]。近来亦有对两性霉素B和棘白菌素类耐药菌株的报道[8]，这进一步加剧深部真菌感染的治疗难度[9-10]。因此，临床迫切需要开发新结构类型、作用于新靶点的抗真菌药物[11]。

    前期课题组对内部化合物库进行了体外抗真菌活性的筛选，发现具有2-芳基-4-取代喹啉类骨架的化合物J6表现出广谱抗真菌活性。本研究拟进一步评价J6对真菌存活、菌丝形成的影响。通过流式细胞仪检测J6对真菌细胞内活性氧(reactive oxygen species，ROS)生成、生物膜通透性和凋亡的影响。化合物J6具有全新的分子结构，对其进行深入的构效关系和作用机制研究，有望发现全新的抗真菌药物。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    化合物库包含231个实体化合物，包含的分子结构有β-双咔啉类生物碱、青蒿素衍生物、吲哚酮螺环和喹啉类衍生物，具有多样性的分子骨架和取代基团，具体的分子结构参照课题组已发表的文献[12-16]。其中化合物J6的化学名为2-(2H-1,3-苯并二恶茂-5-基)-6-甲氧基-N-甲基-N-(丙-2-基)喹啉-4-羧酰胺。由于化合物J6的酰胺氮原子连接了两个不同的化学基团，J6的1H NMR谱图显示存在两个旋转异构体处于动态平衡中，摩尔比例为1.3∶1，这一现象与文献报道一致[17-18]。J6结构表征如下，1H NMR (400 MHz，DMSO-d6)：δ 1.08 (dd，J=22.2 Hz，6.5 Hz)，1.23～1.28 (m)，2.63 (s)，3.02 (s)，3.86 (s ......