袁若栋，董阳超，武福星，段 甜，薛 潘，张 剑，袁明城，薛智丰，张海军，张欠欠，雷迎峰，高小朋

    (1延安大学生命科学学院，陕西 延安 716000；2空军军医大学基础医学院病原生物学与微生物学教研室，陕西 西安 710032)

    腺病毒主要有A～G 7个血清学组，是导致人呼吸道感染的重要病原体。人腺病毒(human adenovirus，HAdV)现有100多个亚型，临床主要表现为发热、呼吸系统疾病、肠胃炎和结膜炎，在低免疫功能患者中，可能会导致呼吸衰竭，出现弥漫性感染、血性膀胱炎，引起神经系统疾病，甚至会导致死亡[1]。HAdV55属于B血清组，是HAdV11和HAdV14的重组体，我国最早从2006年陕西省岐山县暴发的疫情中分离获得[2]。HAdV55主要通过飞沫传播，感染后易出现急性呼吸道感染症状，例如发热、咳嗽、头痛、咽喉肿痛、支气管炎、肺炎、肝炎等，可发展成为重症肺炎[3]。HAdV的主要易感人群是婴儿、学生、新兵和免疫功能低下的患者[4-5]。目前临床上尚无针对腺病毒的特异治疗药物，多采用对症治疗。因此，早期诊断是HAdV55型防控的重点。

    目前关于HAdV55的检测方法，主要包括病毒分离培养、鼻黏膜上皮脱落细胞直接免疫荧光检测病毒抗原、血清学检测和分子生物学方法[6]。前三种方法过程繁琐、耗时长，不适合早期诊断，聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)等分子生物学方法具有快速灵敏等优势，在临床检测中备受青睐[7]。但现有传统检测方法还只是基于Hexon基因部分序列进行分子分型的做法，主要是对各类临床样本进行核酸提取，设计相应引物，采用PCR进行检测，虽然市面上也已出现大量呼吸道病原体检测试剂盒，但无特异性针对HAdV55的检测试剂盒。而传统的PCR扩增检测技术，通过特异性引物对DNA片段进行体外扩增，包括巢式PCR、探针法和染料法实时荧光定量PCR等，这些技术具有高灵敏度、高特异性，技术较为成熟，适合早期临床诊断，但对实验条件、试剂成本、工作人员的技术要求高。基于基因芯片和基因测序技术在腺病毒检测方面也有报道[8-10]，LI等[11]就采用了可获得更高的序列准确性的高通量测序：将纳米孔测序技术和华大基因平台应用于2019年5月中国湖北省HAdV55暴发的鉴定和基因组分析，但这两种主要适用于复杂感染情况下的鉴别诊断，且技术成本昂贵、复杂，检测灵敏度低，尚未在临床诊断HAdV55中广泛应用[12]。重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification ......