张 瑾，张 婷

    纳米金酶联免疫分析法的原理及其在医药检测中应用

    张 瑾，张 婷*

    (上海中医药大学交叉科学研究院 穆拉德中药现代化研究中心，上海 201203)

    综述了纳米金酶联免疫分析法(nano-ELISA)及其增强分析信号的原理，免疫金的制备方法及该技术在医药检测领域中应用的研究进展。查阅相关文献24篇，对纳米金酶联免疫分析法的原理、纳米金的制备方法及其增强分析信号的原理及在多种病原体、标志蛋白、药物有效成分含量等检测中的应用进行归纳总结。纳米金酶联免疫分析法将传统酶联免疫分析(ELISA)与胶体金标记技术相结合，可以大幅提高分析灵敏度，降低待检物的最低检测限。纳米金酶联免疫分析法在早期诊断标记物检测和药物的含量检测及药代动力学检测方面具有广阔的应用前景。

    药剂学；酶联免疫分析；纳米金；医药检测；抗体-抗原

    ELISA技术是19世纪70年代发展起来的一种新型免疫测定技术，其测定原理基于抗原与抗体的特异性结合反应，通过将待测物与酶连接，然后通过分析酶与底物的反应颜色标定待测物的浓度。具有灵敏度高、抗干扰性强且不需要复杂设备的优点，是目前应用最为广泛的免疫分析技术。纳米金具有较高的比表面积和便于修饰的表面，在表面选择性修饰多种基团后可起到探测小分子或生化标记物的作用。同时，纳米金由于表面等离子共振而在500~550 nm内有较强的吸收峰，为分析表面负载物的浓度提供了便利。纳米金酶联免疫分析(gold nanoparticles enzyme-linked immunoassay，nano-ELISA)将两者的优点相结合，能够极大放大检测灵敏度，与传统ELISA相比提高了几十倍甚至几百倍，能更早、更准确地发现某些疾病的标志物，因此近年来在临床医学检测及药物检测中已经有了长足的发展。

    因而，纳米金作为生化标记物越来越多地应用于免疫标记技术，与ELISA技术结合后大幅提高了其检测限[1-2]。本文作者就该方法在医学检测及药物检测等方面中的应用研究现状和发展方向进行综述介绍。

    1 Nano-ELISA分析的基本原理

    Nano-ELISA分析的基本原理与传统ELISA相似。在传统ELISA中，基于抗原抗体的特异性结合原理，使抗原或抗体结合于某种固相的载体表面，并保持它的免疫活性，再利用抗原或抗体和某种酶连接形成酶标抗原或抗体，加入酶反应底物后，底物被酶催化变成有色产物，产物的量与受检物质的量直接相关，所以可以根据颜色反应来进行定性或定量分析。然而一个抗原抗体复合物上仅能连接一个酶标二抗分子 ......