车雨轩，赵云丽，王东凯

    (沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 110016)

    液相色谱—质谱联用法(LC-MS)是以液相色谱为分离手段，以质谱为鉴别方法的分离分析方法。目前，质谱已经存在多种类型，如四极杆质谱(QMS)、离子阱质谱(ITMS)、飞行时间质谱(TOF)、三重四极杆复合线性离子阱质谱(Q-Trap)、三重四极杆复合飞行时间质谱(QTOF)和离子阱复合飞行时间质谱(IT-TOF)等[1]，其优点在于可以得到多级质谱图以推测有机物的裂解方式及其分子结构，灵敏度高、选择性高、分析速度快等。通过和液相色谱联用后，与其分离能力强的优点相结合，为现代药物研究提供了宝贵的分析技术手段。但是，由于一维峰容量有限，难免会存在难以发现的共流出组分；此外，在液相色谱使用过程中，通常流动相中会添加非挥发性的缓冲盐，如磷酸盐，或者加入离子对试剂来改善分离效果，使其达到理想分离度，但这些成分并不能直接进入质谱，即液相系统与质谱系统不相容，这对液质联用技术有着很大的局限性。但近年来，二维液相色谱(2D-LC)与质谱联用技术弥补了液质联用技术的缺点。

    1 2D-LC 与质谱联用技术介绍

    1.1 2D-LC 技术

    2D-LC 技术为多维液相色谱技术的典型代表，二维即由两个分离机制不同的色谱柱通过接口技术串联而成，其中第一维可以是一根或者多根分离机制相同的色谱柱串联而成；第二维可以是一根或者多跟分离机制相同或者不同的色谱柱串联而成[2]。样品通过一维色谱的分离后，经过接口技术进入第二维色谱柱进行进一步的分离，以此减少了成分之间的重叠，有效地扩大了峰容量[3]，也解决了一维色谱的共流出问题。此外，一般一维与二维的分离机制不同可以提高二维液相色谱的正交性以此达到理想的分离效果。其正交性越高分析，效果越好。但也有例外，Feng Hu 等[4]选择了对立体异构体保留相对较弱的 IB 柱用作一维分离柱，而对立体异构体保留较强的 IF3和 IC 柱用作二维分离柱，对泊沙康唑中的 12 种相关异构体进行了分析，得到了理想的结果。这表明手性—手性多中心切割二维液相色谱也能够有足够的正交性，能够分离含有多个不对称中心的手性药物立体异构体。2D-LC 技术先已用于食品、中药、生物样本以及复杂基质样品或手性化合物等难分离混合物的分离分析[5-8]。

    1.1.1 2D-LC 的分类

    2D-LC 可根据第一维分离后是否直接进入下一维分为在线模式和离线模式，在线模式能够选择性将一维色谱的馏分转移到二维色谱柱当中 ......