爱拔益加(AA)肉鸡和北京油鸡红细胞免疫以及黏膜免疫功能的比较研究.pdf
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· 4 2· An i ma l Hu s b a n d r y& Ve t e r i n a r y Me d i c i n e 2 0 0 6 V o 1 . 3 8 No . 8
爱拔益加 ( AA)肉鸡和北京油鸡红细胞免疫以及
黏膜免疫功能的比较研究
马彦博 一,呙于明 ,袁建敏 ,王 忠 ,聂 伟
( 1 .中国农业大学动物科技学院,北京 1 0 0 0 9 4 ;2 .河南科技大学动物科技学院,河南 洛阳 4 7 1 0 0 3 )
摘要 :选用 1日龄健康爱拔益加 ( A A)肉鸡、北京油鸡公雏各 7 2只,检测红细胞 C 3 b 受体 ( R B C - C 3 b R)花环率、红细胞免疫复合物 ( R B C - I C)
花环率以及肠腔中分泌型免疫球蛋白A ( S I g A)含量等指标。结果表明,两品种鸡的R B C - C 3 b 花环率均随日龄的增长逐渐下降,北京油鸡的 R B C -
c R花环率显著高于爱拔益加肉鸡 ( P< 0 . 0 5 ) ,而两品种鸡的 R B C . I C花环率却随 日龄的增长而逐渐升高,爱拔益加肉鸡的 R B C · I C花环率显著
高于北京油鸡 ( P<0 . 0 5 ) 。两品种鸡肠腔中的s l g J ~ 含量随日龄的增长逐渐下降,并且北京油鸡肠腔中的 s l g A含量比爱拔益加肉鸡高。提示爱拔
益加肉鸡和北京油鸡的红细胞免疫和黏膜免疫功能存在着一定的差异。
关键词:爱拔益加肉鸡;北京油鸡;红细胞免疫;黏膜免疫
中图分类号:$ 8 5 8 . 3 1 2 4 文献标识码:B 文章编号:0 5 2 9 - 5 1 3 0 ( 2 0 0 6 ) 0 8 - 0 0 4 2 - 0 3
随着现代养禽业的快速和大规模发展,各种传染病对养鸡
的影响也越来越大。为了使动物能够处于一个健康的状态,常
常通过多种手段来增强动物的免疫机能和抗病能力。但是无论
采取哪些调控手段都应该是以动物机体 自身免疫系统功能发育
规律为基础。本试验 旨在将爱拔益加肉鸡和北京油鸡在笼养状
态下饲养,以期找到两品种鸡红细胞和黏膜免疫功能的发育规
律和差异 ,为生产实际中免疫调节产品的开发与合理利用 、免
疫程序的制定与修正、疾病的预防和治疗 、饲养方式的合理选
择 、品种选育以及饲养环境的优化提供科学的理论依据。
1 材料与方法
1 . 1 主要试剂
补体致敏酵母多糖和未致敏酵母多糖冻干试剂购自上海长
海医院免疫研究室。 I 标记的双抗试剂盒由北京原子高科核
技术应用股份有 限公 司提供。1 2 7 5型 计数器,瑞典 L K B
公司 。
1 . 2 试验动物与分组
试验选用 1日龄健康爱拔益加 ( A r b o r A c r e )肉鸡 、北京
油鸡公雏各 7 2只,每个品种的鸡各 自为一个处理,每个处理
随机分成 6个重复,每个重复 1 2只鸡。试验动物饲养于3层
笼具内,两品种鸡同为 自由采食、饮水。试验期 4 9 d 。
1 . 3 试验日粮和免疫程序
采用玉米- 豆粕型基础 日粮,参照 N R C ( 1 9 9 4 )肉鸡营养
需要配制,供试动物的营养水平完全相同。免疫程序如下 :7
日龄滴鼻 、点眼各一滴接种新城疫Ⅳ疫苗,1 4日龄滴鼻、点
眼各一滴接种法氏囊疫 苗;2 1日龄饮水二次免疫新城疫Ⅳ疫
苗,2 8日龄饮水二次免疫法氏囊疫苗。
收稿 日期:2 0 0 6 . 0 4 - 2 3
项目基金:国家重点基础研究发展计划 ( 2 0 0 4 C B 1 1 7 5 0 4) 。
作者简介:马彦博 ( 1 9 7 8 - ) ,男,回族,助教,硕士。
1 . 4 检测指标与方法
1 . 4 . 1 红细胞 C 受体花环率的测定
红细胞悬液的制备:分别于 7 、1 4 、2 1 、2 8 、3 5 、4 2日龄
从每个品种中随机选取 6只鸡 ( 每个重复 1只) ,翅静脉采集
抗凝血 3 m L ( 肝素抗凝 ,加 U / m L ) ,将抗凝血用 H a n k ’ s液
( 含 C a “ 、Mg 2 ,p H为 7 . 2 )洗涤 3次,每次 2 0 0 0 r / mi n离
心5 m i n ,红细胞计数后将红细胞用生理盐水稀释成 1 . 2 5×
1 0 / mL的红细胞悬液。
补体致敏酵母悬液和酵母悬液的制备:将补体致敏酵母多
糖和未致敏酵母多糖试剂按说明书配制成 1 . 0 ×1 0 个/ m L的
细胞悬液。
红细胞 C 3 b 受体 ( R B C - C R)花环试验:取试管一只加入
鸡红细胞悬液 5 O ,然后再向试管中加入补体致敏酵母悬液
5 0 ,混匀,置3 7℃水浴 4 0 m i n ,取出后轻轻摇匀,加入生
理盐水 1 0 0 I x L,混匀后加 0 . 2 5 %戊二醛溶液2 5 固定5 m i n ,然后取 1 / 2量水平涂片,冷风干燥,甲醇固定后用瑞氏 一姬母
萨混合染色,光学显微镜高倍镜下检查,以 1个红细胞粘附2
个或 2个以上酵母菌细胞为一个花环,计数 2 0 0个红细胞,算
出花环率。
1 . 4 . 2 红细胞免疫复合物 ( R B C - I C)花环率的测定
除酵母菌使用未致敏酵母多糖以外 ,其余操作步骤同上。
1 . 4 . 3 肠腔食糜中S I 的测定
分别于 7 、1 4 、2 1 、2 8 、3 5 、4 2日龄从每个品种中随机选
取 6只鸡 ( 每个重复 1只) ,采集空肠食糜约 3 g ,8 0℃冷冻
保存备用。测定时将食糜取 出自然解冻,然后称取 5 0 0 mg ,用生理盐水稀释5 O倍 ,以3 0 0 0 r / r a i n离心 1 0 r a i n ,吸出上清
液 ,同样条件下再离心一次,最后取 1 0 0 I x L上清夜,采用 I
标记的双抗体放射免疫法测定肠腔食糜中s I g A含量…。
1 . 5 数据处理和统计分析
采用 S P S S 1 1 . 5 f o r w i n d o w s 软件进行 t 检验。试验数据以
平均数 ±标准误表示,百分数经 A R C S I N转换。
维普资讯 http://www.cqvip.com 畜牧与兽医 2 0 0 6年 第 3 8卷 第 8期 · 4 3·
2 试验结果
2 . 1 爱拔益加肉鸡和北京油鸡的红细胞免疫
2 . 1 . 1 爱拔益加肉鸡和北京油鸡的红细胞 C 受体花环率
从表 1 可以看出 ......
爱拔益加 ( AA)肉鸡和北京油鸡红细胞免疫以及
黏膜免疫功能的比较研究
马彦博 一,呙于明 ,袁建敏 ,王 忠 ,聂 伟
( 1 .中国农业大学动物科技学院,北京 1 0 0 0 9 4 ;2 .河南科技大学动物科技学院,河南 洛阳 4 7 1 0 0 3 )
摘要 :选用 1日龄健康爱拔益加 ( A A)肉鸡、北京油鸡公雏各 7 2只,检测红细胞 C 3 b 受体 ( R B C - C 3 b R)花环率、红细胞免疫复合物 ( R B C - I C)
花环率以及肠腔中分泌型免疫球蛋白A ( S I g A)含量等指标。结果表明,两品种鸡的R B C - C 3 b 花环率均随日龄的增长逐渐下降,北京油鸡的 R B C -
c R花环率显著高于爱拔益加肉鸡 ( P< 0 . 0 5 ) ,而两品种鸡的 R B C . I C花环率却随 日龄的增长而逐渐升高,爱拔益加肉鸡的 R B C · I C花环率显著
高于北京油鸡 ( P<0 . 0 5 ) 。两品种鸡肠腔中的s l g J ~ 含量随日龄的增长逐渐下降,并且北京油鸡肠腔中的 s l g A含量比爱拔益加肉鸡高。提示爱拔
益加肉鸡和北京油鸡的红细胞免疫和黏膜免疫功能存在着一定的差异。
关键词:爱拔益加肉鸡;北京油鸡;红细胞免疫;黏膜免疫
中图分类号:$ 8 5 8 . 3 1 2 4 文献标识码:B 文章编号:0 5 2 9 - 5 1 3 0 ( 2 0 0 6 ) 0 8 - 0 0 4 2 - 0 3
随着现代养禽业的快速和大规模发展,各种传染病对养鸡
的影响也越来越大。为了使动物能够处于一个健康的状态,常
常通过多种手段来增强动物的免疫机能和抗病能力。但是无论
采取哪些调控手段都应该是以动物机体 自身免疫系统功能发育
规律为基础。本试验 旨在将爱拔益加肉鸡和北京油鸡在笼养状
态下饲养,以期找到两品种鸡红细胞和黏膜免疫功能的发育规
律和差异 ,为生产实际中免疫调节产品的开发与合理利用 、免
疫程序的制定与修正、疾病的预防和治疗 、饲养方式的合理选
择 、品种选育以及饲养环境的优化提供科学的理论依据。
1 材料与方法
1 . 1 主要试剂
补体致敏酵母多糖和未致敏酵母多糖冻干试剂购自上海长
海医院免疫研究室。 I 标记的双抗试剂盒由北京原子高科核
技术应用股份有 限公 司提供。1 2 7 5型 计数器,瑞典 L K B
公司 。
1 . 2 试验动物与分组
试验选用 1日龄健康爱拔益加 ( A r b o r A c r e )肉鸡 、北京
油鸡公雏各 7 2只,每个品种的鸡各 自为一个处理,每个处理
随机分成 6个重复,每个重复 1 2只鸡。试验动物饲养于3层
笼具内,两品种鸡同为 自由采食、饮水。试验期 4 9 d 。
1 . 3 试验日粮和免疫程序
采用玉米- 豆粕型基础 日粮,参照 N R C ( 1 9 9 4 )肉鸡营养
需要配制,供试动物的营养水平完全相同。免疫程序如下 :7
日龄滴鼻 、点眼各一滴接种新城疫Ⅳ疫苗,1 4日龄滴鼻、点
眼各一滴接种法氏囊疫 苗;2 1日龄饮水二次免疫新城疫Ⅳ疫
苗,2 8日龄饮水二次免疫法氏囊疫苗。
收稿 日期:2 0 0 6 . 0 4 - 2 3
项目基金:国家重点基础研究发展计划 ( 2 0 0 4 C B 1 1 7 5 0 4) 。
作者简介:马彦博 ( 1 9 7 8 - ) ,男,回族,助教,硕士。
1 . 4 检测指标与方法
1 . 4 . 1 红细胞 C 受体花环率的测定
红细胞悬液的制备:分别于 7 、1 4 、2 1 、2 8 、3 5 、4 2日龄
从每个品种中随机选取 6只鸡 ( 每个重复 1只) ,翅静脉采集
抗凝血 3 m L ( 肝素抗凝 ,加 U / m L ) ,将抗凝血用 H a n k ’ s液
( 含 C a “ 、Mg 2 ,p H为 7 . 2 )洗涤 3次,每次 2 0 0 0 r / mi n离
心5 m i n ,红细胞计数后将红细胞用生理盐水稀释成 1 . 2 5×
1 0 / mL的红细胞悬液。
补体致敏酵母悬液和酵母悬液的制备:将补体致敏酵母多
糖和未致敏酵母多糖试剂按说明书配制成 1 . 0 ×1 0 个/ m L的
细胞悬液。
红细胞 C 3 b 受体 ( R B C - C R)花环试验:取试管一只加入
鸡红细胞悬液 5 O ,然后再向试管中加入补体致敏酵母悬液
5 0 ,混匀,置3 7℃水浴 4 0 m i n ,取出后轻轻摇匀,加入生
理盐水 1 0 0 I x L,混匀后加 0 . 2 5 %戊二醛溶液2 5 固定5 m i n ,然后取 1 / 2量水平涂片,冷风干燥,甲醇固定后用瑞氏 一姬母
萨混合染色,光学显微镜高倍镜下检查,以 1个红细胞粘附2
个或 2个以上酵母菌细胞为一个花环,计数 2 0 0个红细胞,算
出花环率。
1 . 4 . 2 红细胞免疫复合物 ( R B C - I C)花环率的测定
除酵母菌使用未致敏酵母多糖以外 ,其余操作步骤同上。
1 . 4 . 3 肠腔食糜中S I 的测定
分别于 7 、1 4 、2 1 、2 8 、3 5 、4 2日龄从每个品种中随机选
取 6只鸡 ( 每个重复 1只) ,采集空肠食糜约 3 g ,8 0℃冷冻
保存备用。测定时将食糜取 出自然解冻,然后称取 5 0 0 mg ,用生理盐水稀释5 O倍 ,以3 0 0 0 r / r a i n离心 1 0 r a i n ,吸出上清
液 ,同样条件下再离心一次,最后取 1 0 0 I x L上清夜,采用 I
标记的双抗体放射免疫法测定肠腔食糜中s I g A含量…。
1 . 5 数据处理和统计分析
采用 S P S S 1 1 . 5 f o r w i n d o w s 软件进行 t 检验。试验数据以
平均数 ±标准误表示,百分数经 A R C S I N转换。
维普资讯 http://www.cqvip.com 畜牧与兽医 2 0 0 6年 第 3 8卷 第 8期 · 4 3·
2 试验结果
2 . 1 爱拔益加肉鸡和北京油鸡的红细胞免疫
2 . 1 . 1 爱拔益加肉鸡和北京油鸡的红细胞 C 受体花环率
从表 1 可以看出 ......
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