畜牧兽 医学报 ， 2 0 0 5 ， 3 6 ( 9 ) ， 9 5 6～9 5 9

    Ac t a Ve t e r i n ar i a e t Zo o t e c hni c a Si n i c a

    甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫功能的影响

    朱晓彤 ， 崔志英 ， 高 萍 ， 江青艳， 束 刚 ， 徐平稳 ， 傅伟龙

    ( 华南农业大学动 物科 学学院 ， 广州 5 1 0 6 4 2 )

    关键 词 ：甘氨酰谷氨酰胺 ； 鸡； 免疫器官 ； 淋巴细胞 ； I L一 2 ； I L一 6

    中图分类号 ：$ 8 5 2 . 4 文献标识码 ：A 文章编号 ：0 3 6 6 — 6 9 6 4 ( 2 0 05 ) 0 9 — 0 9 5 6 — 0 4

    谷氨酰胺( Gl n ) 是动物血液及其它组织 中含量

    最丰富的一种氨基酸， 在维持免疫细胞的正常功能、调节机体免疫机能方面起着重要的作用。Gl n是淋

    巴细胞的主要能量来源 ， 在淋 巴细胞、 巨噬细胞 、 中

    性粒细胞的增殖和活化以及巨噬细胞 、 中性粒细胞

    的过氧 化物 的产 生 中均 具有 重要 的作 用口 ] 。但

    是 ， Gl n的溶 解度较低 ， 在水 中很 不稳定 ， 易分解 。

    上述 特性 限 制 了 Gl n的应 用 。甘 氨 酰谷 氨 酰胺

    ( Gl y c y l - Gl u t a mi n e ， Gl y - Gl n) 是由甘氨酸和谷氨酰

    胺组成的二肽 ， 相对分子质量为 2 0 3 . 1 9 7 U， 其水溶

    液较稳定 ， 且 吸收速 度 比 Gl n单体快 。 目前 Gl y -

    Gl n已取代 Gl n在医学临床 中得到应 用 ， 但是在动

    物生产中应用的报道较少[ 3 ] 。

    本试验 以粤黄鸡为研究对象 ， 通过饮水方式添

    加 Gl y - Gl n， 观察不 同剂量 的 Gl y - Gl n对粤黄鸡 的

    免疫器官发育 、 血清 中自细胞介 素一 2 ( I L 一 2 ) 和 白细

    胞介素- 6 ( I L - 6 ) 水平 以及淋 巴细胞增殖及分泌功能

    的影响 ， 同时采用 离体细胞培养 方法 ， 研究 外源性

    Gl y - Gl n对淋 巴细胞增 殖及分 泌功能 的影 响， 以探

    讨 Gl y - Gl n对鸡免疫功能影响的机制 。

    l 材料与方法

    1 . 1 饲养试验

    3 6 0只 1 1 3龄粤黄鸡( 购 自华南农业大学鸡场)

    随机分成 4 组 ， 每组 9 0只 ， 第 1组为对照组 ， 其余 3

    组为处理组。1 ～4组通过饮水方式分别添加浓度

    为 0 、 1 0 0、 5 0 0 、 1 0 0 0 f f g / L的 Gl y - Gl n溶液。1 ～8

    日龄为预试期 ， 9日龄开始正式试验 ， 至 8 0日龄结

    束。0 ～4周龄饲喂广东省农科院畜牧研究所实验

    饲料厂生产的黄羽小鸡配合饲料 ， 5周龄 以后饲喂

    黄羽中鸡配合饲料。

    收稿 日期 ： 2 0 0 4 — 0 7 — 0 9

    基金项 目： 广东省科技计划资助项 目( 2 0 0 3 C 2 0 2 0 4 )

    作者筒 介： 朱 晓彤 ( 1 9 6 7 一 ) ， 女 ， 副教授 ， 博 士生， 主要从 事动物营养 生

    理与免疫调控研 究

    1 .2 试验指标

    1 . 2 . 1 免疫器官的发育 分别于 4 5 、 8 0日龄随机

    从各组抽取 1 8只接 近平 均体重 的鸡屠宰 ， 取法 氏

    囊 、 胸腺及脾脏称重 ， 计算免疫器官指数 。另取血样

    制备血清 ， 一2 0℃保存 。

    1 . 2 . 2 血清 中 I L- 2和 I L - 6含量 的测定 采用放

    射免疫法( R1 A) 检测 ， 试剂盒购 自天津九鼎生物技

    术公司。

    1 . 2 . 3 外周血和脾脏淋 巴细胞增殖转化测定 4 5

    和 8 0日龄时， 按各组平均体重取 3只鸡 ， 分离外周

    血和脾脏的淋 巴细胞 ， 用浓度为 1 0~ g / mL的 Co n A

    处理 2 4 h后 ， 采用 MTT法_ 5 检测淋 巴细胞增殖转

    化率。

    1 . 2 . 4 淋巴细胞培养液 中 I L - 6的检测 将各组

    分离出的淋巴细胞按 1 x 1 0 / mL的密度接种于 2 4

    孔板上， 培养 4 8 h后 ， 用浓度为 1 0~ g / mL的 C o n A

    处理 2 4 h， 取培养的细胞上清液 ， 3 0 0 0 r / mi n离心 ，用 RI A法测定上清液 中 I L 一 6的含量。

    1 . 3 外源性 Gl y - Gl n对离体培养的淋巴细胞增殖

    转化和分泌功能的影响

    1 . 3 . 1 外源性 Gl y - Gl n对离体培养 的淋 巴细胞增

    殖转化的影响 取 8周龄的健康粤黄鸡 ， 分离外周

    血和脾脏淋巴细胞 ， 按 5 ×1 0 / mL的密度接种于 9 6

    孔板 ， 共设 4组 ， 1个为对照组 ， 另 3个为处理组 ， 每

    组 1 0个重复。培养 2 4 h后 ， 分别用 0 . 6 、 1 . 2和 2 . 4

    mmo l / L的 Gl y - Gl n培养液处理细胞 4 8 h， 采用 M1 v r

    法检测由 C o n A诱导的淋 巴细胞增殖转化率。

    1 . 3 . 2 外源性 Gl y - Gl n对离体培养 的淋巴细胞分

    泌功能 的影响 分 离外周血和脾脏淋 巴细胞， 按 5

    ×1 0 / mL的密度接种于 2 4孔板上， 细胞培养与处

    理同 1 . 3 . 1 。采用 RI A 法检测 细胞上清液 中 I L一 2

    和 I L- 6的含 量 。

    1 . 4 数据 处理

    所得数据均采用 S P S S 1 1 . 0软件进行处理 。组

    间差异用邓肯氏新复级差法 比较 ， 结果用平均数 ±

    维普资讯 http://www.cqvip.com 9期 朱 晓彤等 ： 甘氨酰谷氨酰胺对粤黄鸡免疫 功能的影 响 9 5 7

    标准误表示 。

    2 结 果

    2 . 1 Gl y — Gi n对粤黄鸡免疫器官指数的影响

    由表 1可知 ， 外源性的 Gl y — Gl n对鸡群法 氏囊

    的生长无显著影响( P>0 . 0 5 ) ； 1 0 0 、 1 0 0 0 g / L的

    外源性 Gl y — Gl n可显著降低 8 0日龄鸡群 的胸腺指

    数( P<0 . 0 5 ) ， 而 1 0 0 0 g / L的 Gl y — Gl n可显著提

    高 4 5日龄时鸡群的脾脏指数 ， 5 0 0 g / L的 Gl y - Gl n

    则显著提 高 8 0日龄时鸡群的脾脏指数 ( P<0 . 0 5 ) 。

    表 1 不同浓度的 Gl y - GI n对粤黄鸡免疫器 官指数的影响

    Ta bl e 1 Ef f e c t of d i f f e r e nt d o s a g e s o f Gl y - GI n o n t he i ndi c e s of s pl e e n-bu r s a

    o f Fab r i c i u s a nd t hy mu s of Yu e h ua n g b r oi l e r

    同一列数据肩标字母 相同或 不标注者 为差异不显著 ......