作者单位: 510080 广州, 中山医科大学第一附属医

    院小儿外科

    先天性尿道下裂阴茎皮肤细胞

    雌雄激素受体表达及胞核内的聚集

    李春 谢家伦 卢汉平

    摘要 目的: 探索先天性尿道下裂与阴茎皮肤细胞雄激素受体(AR )、雌激素受体(ER)的表

    达及细胞核内的聚集的关系。方法: 通过受体的放射配基结合分析, 对28 例不同程度的先天性尿

    道下裂患儿外生殖器皮肤细胞内的AR、ER 的表达及细胞内的分布进行了测定。结果: 实验显示

    尿道下裂患儿外生殖器皮肤细胞内及胞核内AR 量较正常对照减少(P < 0. 01) , 尿道下裂的严重

    程度与细胞内及细胞核内的AR 量无关(P > 0. 05)。细胞内总 ER 与正常无显著性差异(P >

    0. 05) , 胞核内ER 量较正常对照减少(P < 0. 05)。结论: AR 异常是先天性尿道下裂的原因之一,先天性尿道下裂也属于雄激素不敏感综合征的范畴, 而核内ER 的减少可能为继发性改变。

    关键词 尿道下裂 雄激素不敏感综合征 雄激素受体 雌激素受体

    Androgen and Estrogen Receptors in Prepuce of Children with Hypospadias L i Chun, X ie

    J ialun, L u H anp ing. D ep t . of P ed iatric S u rg ery , F irst A f f il iated H osp ital of S un Y atsenM ed i2

    cal U niversity , Guang z hou 510080

    Abstract O bject ive: To study the relat ionsh ip betw een androgen recep to rs (AR ) and est ro2

    gen recep to rs (ER ) in cells and nuclei of p repuce in pat ients w ith hypo spadias and the sever ity of

    hypo spadias . M ethods: AR and ER exp ression and its dist r ibut ion in the p reput ial cells of 28 cases

    w ith different types of hypo spadias w ere exam ined by radio ligand binding assay (RBA ). Results:

    The to tal cellular and nuclear AR concent rat ions in p repuce of hypo spadias pat ients w ere low er

    than tho se of cont ro l group (P < 0. 01). There w as no co r relat ion betw een the sever ity of hy2

    po spadias and the cellular and nuclear levels of AR (P > 0. 05). There w as no stat ist ically signif i2

    cant difference in cellular ER betw een the hypo spadias pat ients and the cont ro l group (P > 0. 05).

    The nuclear ER in hypo spadias pat ients w as low er than that of cont ro l (P < 0. 05). Conclusions:

    A bno rmality of AR is a cont r ibut ing facto r in the pathogenesis of hypo spadias . Hypo spadiasmay

    be a manifestat ion of androgen insensibility syndrome . Reduced level of nuclear ER may be a sec2

    ondary change .

    Key words Hypo spadias A ndrogen insensit ivity syndrome A ndrogen recep to r E2

    st rogen recep to r

    先天性尿道下裂是小儿泌尿外科常见的

    先天畸形。其病因除了可能与内分泌因素有

    关外[ 1 ]

    , 雄激素受体 ( androgen recep to r,AR )在其中所起的作用日益受到关注[ 2 ]。本

    实验采用放射配基结合分析的方法, 对先天

    性尿道下裂包皮细胞内的AR 含量及其在细

    胞内的分布进行直接的定量分析, 旨在探讨

    AR 在先天性尿道下裂成因中所起的作用。

    以期对尿道下裂有进一步了解, 并指导其临

    床治疗, 还为今后在AR 分子病理学方面的

    研究打下基础。

    本研究还分析探讨了雌激素受体(est ro2

    gen recep to r, ER )与先天性尿道下裂的相关

    · 572 · 中华小儿外科杂志1998 年10 月第19 卷第5 期

    ? 1995-2006 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.性, 以期发现AR 以外的因素在尿道下裂形

    成过程所起的作用。

    材 料 与 方 法

    一、试剂

    3

    H2 R1881,3

    H2E2, TEDGM 缓 冲 液,STM 缓冲液。

    二、检测对象

    1. 正常学龄前男性儿童30 例。

    2. 先天性尿道下裂 28 例, 其中阴茎型

    13 例, 阴茎阴囊型7 例, 会阴型8 例。年龄2

    ～ 13 岁, 平均年龄5 岁。

    以上分别取自手术切除的包皮, 离体标

    本立即置入液氮中保存, 1 周内完成测定。

    三、主要实验方法

    1. 胞浆与胞核悬液的制备, 在缓冲液

    中将组织匀浆, 然后通过离心沉淀过滤的方

    法获得胞浆与胞核悬液。Low ry 法测定胞浆

    及胞核悬液的蛋白浓度。

    2. 配基的特异性结合, 采用放射配基

    结合分析(RBA ) , 将制备好的胞浆及胞核分

    别与终浓度为5. 0 nmo l? L 的3

    H2 R1881、3

    H2E2

    进行饱和反应。设置总结合管(TB)及非特异

    性结合管(N SB)。L KB21210 多道液闪仪测

    量各反应管的放射性计数。

    3. 计算

    SB= TB- N SB SB (fmo l? mg P ro tein)

    =

    SB (DPM )

    SA (DPM ? fmo l)×反应液蛋白含量(mg)

    4. 用SPSS? PC+ +

    软件进行 t 检验及方

    差分析两两比较。

    结 果

    1. 尿道下裂组细胞内总的AR 量及胞

    核内的AR 量均比正常对照组的少(P <

    0. 01) (表1) ......