收稿日期： ! " " " # " $ # ! % ! 沈阳药大集崎制药有限公司! "种吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量测定

    侯晓虹 于治国 徐赞美 王 艳& 戴凤丽! 毕开顺

    沈阳药科大学药学系， 沈阳 & & " " & ’； & 辽宁省肿瘤医院， 沈阳 & & " " % !

    摘 要 建立了吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的反相高效液相色谱法， 并用该法测定了$ %种

    不同产地及不同炮制方法吴茱萸中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量( 采用峰面积内标法定量( 吴茱

    萸碱和吴茱萸次碱在" ) ’!! "* / +,范围内均呈线性， 相关系数分别为" ) - - --、 " ) - - -.， 平均回收

    率分别为- / ) /0、 - / ) "0(

    关键词 吴茱萸； 吴茱萸碱； 吴茱萸次碱； 反相高效液相色谱法

    分类号 1 - & %( &

    吴 茱 萸 为 常 用 中 药，始 载 于《神 农 本 草

    经》 〔&〕 ( 《中国药典》 & - - ’年版二部收载的吴茱萸

    为芸香科植物吴茱萸 ! " # $ % &’ ( ) & * + & ’ , & (2 3 4 4 ( )

    5 6 7 8 9 ( 、石 虎 ! " # $ % &’ ( ) & * + & ’ , & (2 3 4 4 ( ) 5 6 7 8 9(

    : ; < ( # - - % + % . & / % 0 (= > ? 6) @ 3 ; 7 *及蔬毛吴茱萸 ! " # 1

    $ % &’ ( ) & * + & ’ , & (2 3 4 4 ( ) 5 6 7 8 9( : ; < ( 2 # $ % . % * ’ % (= > ? 6 )

    @ 3 ; 7 *的干燥将近成熟果实( 具有散寒止痛、 降逆

    止呕、 助阳止泄功能( 吴茱萸碱和吴茱萸次碱是吴

    茱萸的主要成分， 近年来， 一些学者提出吴茱萸碱

    和吴茱 萸次碱的 定量 分 析方 法，如 酸碱滴 定

    法 〔!〕 、 薄层扫描法 〔$， %〕 、 高效液相色谱法 〔’!& &〕 ( 其

    中， 酸碱滴定法测定的是生物碱总量； 薄层扫描法

    精密度低( 最近几年， 高效液相色谱法报道较多，但未见用于测定$ %种不同品种、 不同产地、 不同

    炮制方法吴茱萸药材的含量( 作者利用反相高效

    液相色谱法测定了收集到的吴茱萸中吴茱萸碱和

    吴茱萸次碱的含量， 并对测定结果进行了比较( 结

    果发现， 不同品种、 不同产地、 不同炮制方法的吴

    茱萸中两种成分的含量存在较大差异( 作者采用

    峰面积内标法定量使测定结果更准确( 本法为吴

    茱萸的质量控制及保证药效提供了可靠的依据和

    方法( 吴茱萸碱和吴茱萸次碱的结构式见图&(

    # $ %& ’ ( ) *+ , - * . / - 0 12 3 1 / . 3 / 1 * 2, 4* 5 , 6 $ 0 + $ 7 *0 7 61 / 3 0 * 8

    . 0 1 9 $ 7 *

    ’ 仪器与试药

    高效液相色谱仪： 岛津 , A—& " B =恒流泵，C D =— & " B紫外可见检测器， A 5E—& " B 色谱工

    作站； 对照品： 吴茱萸碱、 吴茱萸次碱和醋酸甲羟

    孕酮均购于中国药品生物制品检定所； 样品： 吴茱

    萸生药自行采集于四川、 江西、 湖南、 贵州、 浙江、广西等地并由专家鉴定； 试剂： 乙腈 (色谱纯) ， 四

    氢呋喃、 冰醋酸、 甲醇 (均为分析纯) (

    对照品储备液的配制： 精密称取吴茱萸碱、 吴

    茱萸次碱对照品各!( ’+ *， 置! ’+,量瓶中， 用

    甲醇溶解并稀释至刻度， 摇匀(

    内标物储备液的配制： 精密称取醋酸甲羟孕

    酮’ "+ *， 置& " "+,量瓶中， 用甲醇溶解并稀释

    至刻度， 摇匀(

    : 方法与结果

    :& ’ 色谱条件

    固定相： C F 9 6 < G 4 > < HI = CA & .柱 (% ) / ++J! ’ "++， & "" +) ； 流动相： 乙腈 # 水 # 四氢呋喃 # 冰醋

    酸 (体积比’ ’ K % ’ K & ) ’ K " ) &) ； 柱温： 室温； 流速：

    " ) .+, / + G 7； 检测波长： ! ! ’7 +； 内标物： 醋酸甲

    羟孕酮； 进样量： ! "" ,(

    :& : 标准曲线的绘制

    分别精密吸取吴茱萸碱和吴茱萸次碱对照品

    储备 液 各 " ) " ’、 " ) &、 " ) ’、 & ) "、 ! ) " + ,， 分 别 置

    & "+ ,量瓶中， 精密加入内标物储备液! ) "+ ,， 用

    甲醇稀释至刻度， 摇匀( 微孔滤膜 (" ) % ’" +) 过滤，按上述色谱条件进行 @ D , A分析( 色谱图见图&(

    第&L卷 第’期!""" 年 - 月

    沈 阳 药 科 大 学 学 报

    2 > 3 < 7 ; M > NC 9 6 7 O ; 7 *D 9 ; < + ; P 6 3 8 G P ; MQ 7 G : 6 < 4 G 8 O

    R > M ) & L S > ) ’

    C 6 F ) ! " " " F ) $ $ %以吴茱萸碱和吴茱萸次碱峰面积与内标物峰面积

    之比对吴茱萸碱和吴茱萸次碱的浓度 (! ! / " #) 标

    绘$ 结果表明， 吴茱萸碱、 吴茱萸次碱在% & ’"

    ( %! ! / " #范围内线性关系良好， 回归方程分别为：!)*’ & + , (-. %*/0+ & , 1 (-. %*("， #)

    % & 1 1 11 ($)’) ；!)*’ & 2 , 2-. %*/0, & / + .-. %*("， #)

    % & 1 1 12 ($)’) $! " #$ % & ’ ( ) * + , ) # ( + * -) ./ 0 ) 1 " + * " 2 /+ 2 1( 3 , + / 4 + ( 5 " 2 /

    .—3 4 5 6 7 8 " 7 9 : ；(—; < = 8 : > 8 ? @ 7 9 : ；/—A : 6 ? 5 B C @ ? 5 ! : D = : ? 5 9

    8 > : = 8 = : ( 7 D )

    %$ 6 精密度试验

    仪器精密度： 取上述某一对照品溶液， 在上述

    色谱条件下， 重复进样E次， 根据测定的对照品含

    量 (! ! / "#)计算 相 对 标 准偏差， % & ’ 分 别 为

    ( & /F和( & ’F$

    方法精密度： 取吴茱萸碱和吴茱萸次碱对照

    品储备液’份， 每份% & ’"#， 按 “标准曲线的绘

    制” 项下操作， 进行 G H # I分析$ 根据测出的对照

    品含量 (! ! / "#) ， 测得本方法的精密度 % & ’ 分

    别为( & .F和( & ,F$

    样品测定的精密度： 精密称取同一生药样品

    ’份， 每份.!， 按 “样品测定” 项下操作， 分别测定

    吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量， % & ’ 分别为

    / & .F和/ & EF$

    %$ 7 回收率试验

    以贵州安顺吴茱萸为样品， 精密称取适量， 置

    索氏提取器中， 分别精密加入吴茱萸碱和吴茱萸

    次碱对照品储备液一定量， 按 “样品测定” 项下操

    作， 进行G H # I分析， 计算回收率， 结果见表.$

    8 + 9$ : ; / , / ( * " 2 + , " ) 2) . , ’ /( / 4 ) 0 / ( <) ./ 0 ) 1 " + * " 2 /+ 2 1( 3 , + / 4 + ( 5 " 2 /

    J 5 3 4 5 6 7 8 " 7 9 :

    K 6 6 : 6 / " ! L ? 7 ! 7 9 8 M / " ! N 5 < 9 6 / " ! ; : > 5 4 : ? C /F; < = 8 : > 8 ? @ 7 9 :

    K 6 6 : 6 / " ! L ? 7 ! 7 9 8 M / " ! N 5 < 9 6 / " ! ; : > 5 4 : ? C /F

    . ($ ’ % ’$ ’ E 2$ % % 1 E$ + ($ ’ % ,$ % + E$ ’ % 1 +$ (

    ( ($ ’ % ’$ , . +$ 2 % 1 ’$ ’ ($ ’ % ,$ . . E$ , 2 1 ,$ 1

    / ($ ’ % ’$ E 2 2$ % , 1 ,$ ( ($ ’ % ,$ % / E$ , ’ 1 E$ +

    , ($ ’ % ’$ / ( +$ + + 1 2$ . ($ ’ % /$ 1 . E$ / E 1 2$ %

    ’ ($ ’ % ’$ E E 2$ . / 1 2$ + ($ ’ % /$ 2 , E$ . + 1 /$ /

    A : 8 9 1 E$ E 1 E$ %

    % & ’ /F .$ 1 ($ %

    %$ = 样品测定

    精密称取吴茱萸生药样品 (除去杂梗) .! ......