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编号:11681686
(第八册)微生物与血库作业指导书 .doc
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    微生物与血库

    作业指导书

    文件编号:ABCD-3-WS-01~10

    ABCD-3-WS-01~05

    第A版

    编制:

    审核:

    批准:

    生效日期:2006年8月8日

    ABCD人民医院检验科

    目 录

    序号主 题 内 容 代 号页 号微生物室作业指导书部分 1结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定ABCD-3-WS-0142涂片找抗酸杆菌操作规程

    ABCD-3-WS-0263普通细菌培养鉴定操作规程

    ABCD-3-WS-0384尿液培养操作规程

    ABCD-3-WS-04105血液培养操作规程

    ABCD-3-WS-05126黑马Bact-ist微生物分析系统操作维护规程

    ABCD-3-WS-06147GNP-9270型隔水式恒温培养箱操作维护规程

    ABCD-3-WS-07188BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程

    ABCD-3-WS-08199BSC-1100ⅡB2型生物安全柜操作维护规程

    ABCD-3-WS-092410飞鸽牌离心机操作维护规程

    ABCD-3-WS-1028血库作业指导书部分1血库工作制度

    ABCD-3-XK-01302交叉配血(凝聚胺法)

    ABCD-3-XK-02313ABO血型鉴定(生理盐水法)

    ABCD-3-MY-03334ABO正定型和Rh血型鉴定

    ABCD-3-MY-04385KJX-IA型冰冻血浆解冻箱

    ABCD-3-MY-0541

    修 订 页

    序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期123456789101112131415161718192021

    结核分支杆菌药敏和初步菌种鉴定

    1 检验目的

    做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。

    2 原理

    若接种的MGIT培养管中有分支杆菌生长,管中的营养成分和氧气将不断被消耗,MGIT培养管中的荧光显示剂将随着管内氧气浓度的变化而发生反应。一旦培养管内氧气被利用,管内荧光指示剂将在特定光源的激活下释放荧光。BACTEC MGIT960荧光强度记忆探测器将每隔60min连续测定培养管内荧光强度,从而判断管内分支杆菌生长情况。

    3 标本要求

    (1)标本类型:深部痰液。

    (2)标本采集:见标本采集手册

    (3)标本储存和运输:室温放置,室温运输并立即送检。

    (4)标本拒收状态:非无菌方式采集的标本。

    4 容器和添加剂类型

    使用灭菌器皿盛放标本,不加任何防腐剂。

    5 试剂

    (1)试剂名称:Middlebrook7H9培养肉汤,OADC营养添加剂,抑菌剂PANTA。

    (2)试剂生产厂家:美国BD生物技术有限公司

    (3)包装规格:7X100

    (4)试剂盒组成:培养肉汤,营养添加剂,抑菌剂

    6仪器设备:

    BACTEC MGIT960全自动分支杆菌培养仪;美国BD生物技术有限公司。

    酒精灯

    显微镜、超净工作台、台式离心机

    7校准程序

    (送XX市计量质量检测研究所校准)

    8操作步骤

    见仪器操作维护规程:BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程;

    9质量控制:

    参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动

    10 生物参考区间

    阴性

    11 患者检验结果的可报告区间

    阴性/阳性,药敏及菌种鉴定见BD960结核分支杆菌培养仪操作维护规程;

    12 临床意义:

    分支杆菌的药敏试验有助于筛选有效的抗结核药物,提示药物所需的治疗剂量,供临床医生和防痨医生参考;同时,还可了解耐药株的流行情况,为抗结核药物的合理应用提供试验依据。

    涂片找抗酸杆菌操作规程

    (改良碱性复红法)

    1 检验目的

    检验样本中是否含有抗酸杆菌,为临床提供诊断依据。

    2 原理

    结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层脂或脂质之皮膜不易着色,但一经着色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色(红色)。

    3标本要求

    (1)标本类型:病人的痰、穿刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等

    (2)标本采集:见标本采集手册(一般须得深咳痰,其它无特殊要求。)

    (3)标本储存和运输:可室温保存、室温运送。病人标本须密封运送以避免污染环境。

    4 容器和添加剂类型

    痰盒、尿杯、试管等

    6 试剂

    (1) 试剂名称:结核菌染色液

    (2)试剂生产厂家:广东省结核病研究所统一配制

    (3)包装规格:3X500ML

    (4)试剂盒组成:

    试剂1:石碳酸复红液

    试剂2:酸性酒精溶液

    试剂3:亚甲基蓝溶液

    7仪器设备:

    CHKIKO320 奥林巴斯双目显微镜 BH-2奥林巴斯落射荧光显微镜

    8 校准程序

    送XX市计量质量检测研究所校准

    9操作步骤

    ⑴涂片经火焰固定,加石碳酸复红液染色5分钟或更久(需加温)。

    ⑵水洗(之后尽可能将水沥干)。

    ⑶加酸性酒精溶液,脱色1-2分钟。

    ⑷水洗(假如标本面还可以看到残存红色时,再加酸性酒精溶液脱掉红色为止)。

    ⑸加亚甲基蓝溶液染色30秒,水洗,干燥。

    (6)镜检。

    10 质量控制:

    参加我科质量管理组的质量控制活动。

    11 干扰和交叉反应

    麻风菌可能对检验结果产生影响。

    12 生物参考区间

    涂片未见抗酸杆菌

    13 患者检验结果的可报告区间

    涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌

    14 临床意义:

    结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素,其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力,细菌成分与其代谢产物引起免疫反应(Ⅳ型)导致一系列组织学上的意义。

    普通细菌培养鉴定操作规程

    1 检验目的

    做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。

    2 原理

    人体很多部位与外界相通,存在栖息菌群,但不致病,当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义;另外机体某些部位是无菌的 ,如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。

    3 标本要求 ......

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