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分子克隆实验指南.pdf
http://www.100md.com 2020年11月25日
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    分子克隆实验指南版

    《分子克隆实验指南》的前两版以其无可匹敌的声誉,在近20年的时间里一直被作为分子生物学实验的经典参考书,小编今天准备了分子克隆实验指南上册的书籍,下册的小编会持续的出来的,大家可以期待一下哦

    内容简介

    《分子克隆实验指南(第3版)(套装上下册)》内容简介:《分子克隆实验指南》的前两版以其无可匹敌的声誉,在近20年的时间里一直被作为分子生物学实验的经典参考书。在第三版中,作者对图书内容进行了完全的升级,修订了实验的每条方案,增加了大量新的材料,拓宽了它涉及的领域,内容丰富而详细,使其具有用于学习遗传学、分子细胞生物学、发育生物学、微生物学、神经科学和免疫学等科学的重要指导和参考价值。《分子克隆实验指南(第3版)(套装上下册)》具有先进性、实用性、权威性的特点,是生命科学实验室内当之无愧的“圣经”。

    《分子克隆实验指南(第3版)(套装上下册)》可供生物学、医药卫生,以及农、林、牧等方面有关的科研、教学与技术人员参考。

    相关内容部分预览

    目录

    译者序 [1]

    第四版前言

    上册

    第1章 DNA的分离及定量 1

    导言 2

    方案1 SDS碱裂解法制备质粒DNA:少量制备 9

    方案2 SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备 12

    方案3 从革兰氏阴性菌(如Ecolz中分离DNA 15

    方案4 乙醇法沉淀DNA 17

    方案5 异丙醇法沉淀DNA 21

    方案6 用微量浓缩机进行核酸的浓缩和脱盐 22

    方案7 丁醇抽提法浓缩核酸 23

    方案8 聚乙二醇沉淀法制备Ml3噬菌体单链DNA 24

    方案9 Ml3噬菌体铺平板 27

    方案10 Ml3噬菌体液体培养 30

    方案11 Ml3噬菌体双链(复制型)DNA的制备 32

    方案12 利用有机溶剂分离纯化高分子质量DNA 35

    方案13 用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA 37

    方案14 一步法同时提取细胞或组织中的DNA、RNA和蛋白质 43

    方案15 从鼠尾或其他小样本中制备基因组DNA 46

    替代方案:不使用有机溶剂从鼠尾分离DNA 48

    替代方案:一管法从鼠尾中分离DNA 49

    方案16 快速分离酵母DNA 50

    方案17 微型凝胶电泳后使用溴化乙锭(EB)估算条带中DNA数量 52

    方案18 利用Hoechst33258通过荧光分析仪估算DNA浓度 53

    方案19 用PicoGreen定量溶液中的DNA 55

    信息栏 56

    第2章 DNA分析 62

    导言 63

    方案1 琼脂糖凝胶电泳 73

    方案2 琼脂糖凝胶中DNA的染色检测 76

    方案3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 80

    方案4 聚丙烯酰胺凝胶中DNA的染色检测 85

    方案5 聚丙烯酰胺凝胶中DNA的放射自显影检测 86

    方案6 碱性琼脂糖凝胶电泳 87

    附加方案:碱性琼脂糖凝胶的放射自显影 90

    方案7 成像:放射自显影和感光成像 91

    方案8 用玻璃珠从琼脂糖凝胶中回收DNA 96

    方案9 低熔点琼脂糖凝胶中DNA的回收:有机溶剂抽提法 98

    方案10 聚丙烯酰胺凝胶中DNA片段的回收:压碎与浸泡法 101

    方案11 Southern印迹 103

    方案12 Southern印迹:DNA从一块琼脂糖凝胶同时向两张膜转移 110

    方案13 采用放射性标记探针对固定在膜上的核酸DNA进行Southern杂交 112

    附加方案:从膜上洗脱探针 117

    信息栏 119

    第3章 质粒载体克隆与转化 122

    导言 123

    方案1 制备和转化感受态大肠杆菌的Hanahan方法:高效转化策略 126

    方案2 制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue方法:“超级感受态”细胞 131

    方案3 大肠杆菌的简单转化:纳米颗粒介导的转化 135

    替代方案:一步法制备感受态大肠杆菌:在同一溶液中转化和储存细菌细胞 136

    方案4 电穿7L法转化大肠杆菌 138

    方案5 质粒载体克隆:定向克隆 143

    方案6 质粒载体克隆:平末端克隆 145

    方案7 质粒DNA的去磷酸化 148

    方案8 向平末端DNA添加磷酸化衔接子/接头 150

    方案9 克隆PCR产物:向扩增DNA的末端添加限制性酶切位点 151

    方案10 克隆PCR产物:平末端克隆 154

    方案11 克隆PCR产物:制各T载体 157

    方案12 克隆PCR产物:TA克隆 159

    方案13 克隆PCR产物:TOPO TA克隆 161

    方案14 使用X-Gal和IPTG筛选细菌菌落:a-互补 165

    信息栏 167

    第4章 Gateway重组克隆 205

    导言 206

    方案1 扩增Gatewav载体 210

    方案2 制备可读框入门克隆和目的克隆 213

    方案3 应用多位点LR克隆反应制备目的克隆 219

    信息栏 222

    第5章 细菌人工染色体及其他高容量载体的应用 223

    导言 224

    方案1 BAC DNA的小量分离和PCR检验 235

    方案2 BAC DNA的大量制备和线性化 238

    方案3 通过脉冲电场凝胶电泳检验BAC DNA的质量和数量 241

    方案4 两步BAC工程:穿梭载体DNA的制备 242

    方案5 A同源臂(A-Box)和B同源臂(B-Box)的制备 244

    方案6 克隆A和B同源臂到穿梭载体 247

    方案7 重组穿梭载体的制备和检验 249

    方案8 通过电穿7L法转化重组穿梭载体到感受态BAC宿主细胞 251

    方案9 共合体的检验和重组BAC克隆的筛选 253

    方案10 一步BAC修饰:质粒制备 256

    方案11 A同源臂(A-Box)的制备 259

    方案12 克隆A同源臂到报道穿梭载体 260

    方案13 用RecA载体转化BAC宿主 263

    方案14 转移报道载体到BACiRecA细胞以及共合体的筛选 265

    方案15 酿酒酵母(S.cerevisiae)的生长和DNA制备 267

    方案16 酵母DNA的小量制备 269

    信息栏 270

    第6章 真核细胞RNA的提取、纯化和分析 275

    导言 276

    方案1 从哺乳动物的细胞和组织中提取总RNA 279

    替代方案 从小量样本提取RNA 281

    方案2 从斑马鱼胚胎和成体中提取总RNA 282

    方案3 从黑腹果蝇提取总RNA 283

    方案4 从秀丽隐杆线虫中提取总RNA 285

    方案5 从酿酒酵母菌中采用热酸酚提取总RNA 287

    方案6 RNA定量和储存 289

    方案7 RNA的乙醇沉淀 295

    方案8 通过无RNase的DNaseI处理去除RNA样品中的DNA污染 297

    方案9 oligo(dT)磁珠法提取poly(A)+mRNA 298

    方案10 按照大小分离RNA:含甲醛的琼脂糖凝胶电泳 308

    方案11 根据分子质量大小分离RNA: RNA的尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 312

    方案12 琼脂糖凝胶中变性RNA的辖膜和固定 319

    替代方案 下行毛细管转移 323

    方案13 聚丙烯酰胺凝胶的电转移和膜固定 325

    方案14 Northern杂交 327

    方案15 纯化RNA的点杂交和狭缝杂交 330

    方案16 用核酸酶Sl对RNA作图 342

    方案17 核糖核酸酶保护分析:用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图 349

    方案18 引物延伸法分析RNA 355

    信息栏 359

    第7章 聚合酶链反应 363

    导言 364

    方案1 基础PCR 375

    方案2 热启动PCR 380

    方案3 降落PCR 383

    方案4 高GC含量模板的PCR扩增 385

    方案5 长片段高保真PCR (LA PCR) 390

    方案6 反向PCR 393

    方案7 巢式PCR 397

    方案8 mRNA反转录产物cDNA的扩增:两步法RT-PCR 400

    方案9 由mRNA的5'端进行序列的快速扩增:5'-RACE 409

    方案10 由mRNA的3'端进行序列的快速扩增:3 '-RACE 416

    方案11 使用PCR筛选克隆 422

    信息栏 424

    第8章 生物信息学 431

    导言 432

    方案1 使用ucsc基因组浏览器将基因组注释可视化 434

    方案2 使用BLAST和ClustalW进行序列比对和同源性检索 444

    方案3 使用Primer3Plus设计PCR引物 450

    方案4 使用微阵列和RNA-seq进行表达序列谱分析 461

    方案5 将上亿短读段定位至参考基因组上 472

    方案6 识别ChIP-seq数据集中富集的区域(寻峰) 483

    方案7 发现顺式调控基序 495

    信息栏 503

    中册

    第9章 实时荧光聚合酶链反应定量检测DNA及RNA 509

    导言 510

    方案1 实时PCR反应用引物和探针浓度的优化 532

    方案2 制作标准曲线 537

    方案3 实时荧光PCR定量检测DNA 540

    方案4 实时荧光PCR定量检测RNA 542

    方案5 实时荧光PCR实验数据的分析和归一化 545

    信息栏 550

    第10章 核酸平台技术 551

    导言 552

    方案1印制微阵列 560

    方案2 Round A/RoundB DNA扩增 564

    方案3 核小体DNA和其他小于500bp的DNA的T7线性扩增(TIAD) 567

    方案4 RNA的扩增 572

    方案5 RNA的Cvanine-dUTP直接标记 578

    方案6 RNA的氨基烯丙基-dUTP间接标记 581

    方案7 用Klenow酶对DNA进行Cyanine-dCTP标记 583

    方案8 DNA的间接标记 585

    方案9 封闭自制微阵列上的多聚赖氨酸 587

    方案10 自制微阵列的杂交 589

    第11章 DNA测序 595

    导言 596

    方案1 毛细管测序质粒亚克隆的制备 620

    方案2 毛细管测序之PCR产物的制备 625

    方案3 循环测序反应 627

    方案4 全基因组:手工文库制备 630

    方案5 全基因组:自动化的无索引文库制备 636

    附加方案 自动化的文库制备 642

    方案6 全基因组:自动化的带索引文库制备 644

    方案7 用于Illumina测序的3kb末端配对文库的制备 651

    方案8 用于Illumina测序的8kb末端配对文库的制备 659

    附加方案 AMPure磁珠校准 671

    方案9 RNA—Seq:RNA反转录为cDNA及其扩增 673

    附加方案 RNACleanⅪ’磁珠纯化/RNA—Seq前) 679

    方案10 液相外显子组捕获 680

    附加方案 AMPure XP磁珠纯化 688

    附加方案 琼脂糖凝胶大小筛选 689

    方案11 自动化大小筛选 690

    方案12 用SYBR Green-qPCR进行文库定量 693

    方案13 用PicoGreen荧光法进行文库DNA定量 696

    方案14 文库定量:用Qubit系统对双链或单链DNA进行荧光定量 700

    方案15 为454测序制备小片段文库 702

    方案16 单链DNA文库的捕获及emPCR 708

    方案17 Rochei454测序:执行一个测序运行 714

    方案18 结果有效性确认 721

    方案19 测序数据的质量评估 723

    方案20 数据分析 724

    信息栏 725

    第12章 哺乳动物细胞中DNA甲基化分析 729

    导言 730

    方案1 DNA亚硫酸氢盐测序法检测单个核苷酸的甲基化 735

    方案2 甲基化特异性聚合酶链反应法检测特定基因的DNA甲基化 742

    方案3 基于甲基化胞嘧啶免疫沉淀技术的DNA甲基化分析 745

    方案4 高通量深度测序法绘制哺乳动物细胞DNA甲基化图谱 749

    方案5 亚硫酸氢盐转化的DNA文库的Roche454克隆测序 760

    方案6 亚硫酸氢盐转化的DNA文库的Illumina测序 765

    信息栏 770

    第13章 标记的DNA探针、RNA探针和寡核苷酸探针的制备 775

    导言 776

    方案1 随机引物法:用随机寡核苷酸延伸法标记纯化的DNA片段 792

    方案2 随机引物法:在融化琼脂糖存在下用随机寡核苷酸延伸法标记DNA 798

    方案3 用切口平移法标记DNA探针 800

    方案4 用聚合酶链反应标记DNA探针 804

    附加方案 不对称探针 808

    方案5 体外转录合成单链RNA探针 809

    附加方案 用PCR法将噬菌体编码的RNA聚合酶启动子加至DNA片段上 816

    方案6 用随机寡核苷酸引物法从mRNA合成cDNA探针 818

    方案7 用随机寡核苷酸延伸法制备放射性标记的消减cDNA探针 820

    方案8 用大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段标记双链DNA的3' 端 825

    方案9 用碱性磷酸酶进行DNA片段的去磷酸化 831

    方案10 含5'突出羟基端的DNA分子磷酸化 833

    方案11 去磷酸化的平端或5'凹端DNA分子的磷酸化 836

    方案12 用T4多核苷酸激酶进行寡核苷酸5'端的磷酸化 839

    方案13 用末端脱氧核苷酸转移酶标记寡核苷酸3'端 841

    替代方案 用TdT合成非放射性标记的探针 843

    附加方案 加尾反应 843

    附加方案 合成非放射性标记探针的修饰 844

    方案14 用大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段标记合成的寡核苷酸 845

    方案15 用乙醇沉淀法纯化标记的寡核苷酸 849

    方案16 用空间排阻层析法纯化标记的寡核苷酸 850

    方案17 用Sep-PakCl8柱色谱法纯化标记的寡核苷酸 852

    方案18 寡核苷酸探针在水溶液中杂交: 在含季铵盐缓冲液中洗涤 854

    信息栏 857

    第14章 体外诱变方法 871

    寻言 872

    方案1 用易错DNA聚合酶进行随机诱变 879

    方案2 重叠延伸PCR产生插入或缺失诱变 890

    方案3 以双链DNA为模板的体外诱变:用DpnI选择突变体 897

    方案4 突变型B一内酰胺酶选择法定点诱变 904

    方案5 通过单一限制性位点消除进行寡核苷酸指导的诱变/USE诱变) 910

    方案6 利用密码子盒插入进行饱和诱变 915

    方案7 随机扫描诱变 922

    方案8 多位点定向诱变 926

    方案9 基于PCR的大引物诱变 930

    信息栏 933

    第15章 向培养的哺乳动物细胞中导入基因 937

    导言 938

    方案1 阳离子脂质试剂介导的DNA转染 942

    替代方案 采用DOTMA和DOGS进行转染 948

    附加方案 单层细胞组织化学染色检测B一半乳糖苷酶 950

    方案2 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞 952

    替代方案 磷酸钙介导的质粒DNA高效转染真核细胞 956

    方案3 磷酸钙介导的高分子质量基因组DNA转染细胞 959

    替代方案 磷酸钙介导的贴壁细胞的转染 962

    替代方案 磷酸钙介导的悬浮生长细胞的转染 963

    方案4 DEAE-葡聚糖介导的转染:高效率的转染方法 964

    替代方案 DEAE-葡聚糖介导的转染:提高细胞活力的方案 966

    方案5 电穿孑L转染DNA 968

    方案6 通过alamarBlue法分析细胞活力 972

    方案7 通过乳酸脱氢酶法分析细胞活力 974

    方案8 通过MTT法分析细胞活力 977

    信息栏 980

    第16章 向哺乳动物细胞中导入基因:病毒载体 998

    导言 999

    方案1 直接克隆法构建重组腺病毒基因组 1 019

    方案2 将克隆的重组腺病毒基因组释放用于挽救和扩增 1023

    方案3 氯化铯梯度沉降法纯化重组腺病毒 1028

    方案4 限制性内切核酸酶消化法鉴定纯化后的重组腺病毒基因组 1031

    方案5 TCID50终点稀释结合qPCR测定重组腺病毒感染滴度 1034

    附加方案 准备qPCR的DNA标准品 1042

    方案6 浓缩传代和Real-Time qPCR法检测有复制能力腺病毒(RCA) 1043

    方案7 瞬时转染法制备rAAV 1051

    方案8 氯化铯梯度沉降法纯化rAAV 1054

    方案9 碘克沙醇梯度离心法纯化rAAV 1059

    方案10 肝素亲和层析法纯化rAAV2 1062

    方案11 阴离子交换柱层析法从碘克沙醇梯度离心后的rAAV样本中富集完全包装病毒 1065

    方案12 实时定量PCR法测定rAAV基因组拷贝数 1068

    方案13 TCID50终点稀释结合qPCR法灵敏测定rAAV惑染滴度 1071

    方案14 负染色法和高分辨电子显微镜分析rAAV样本形态 1074

    方案15 银染SDS-PAGE分析rAAV纯度 1076

    方案16 高滴度反转录病毒和慢病毒载体的制备 1079

    方案17 慢病毒载体的滴定 1085

    方案18 监测慢病毒载体储备液中的可复制型病毒 1089

    信息栏 1091

    下册

    第17章 利用报道基因系统分析基因表达调控 1102

    导言 1103

    方案1 哺乳动物细胞提取物中B一半乳糖苷酶的测定 1112

    附加方案 化学发光实验检测B一半乳糖苷酶活性 1115

    方案2 单萤光素酶报道基因实验 1118

    方案3 双萤光素酶报道基因实验 1123

    方案4 酶联免疫吸附试验定量检测绿色荧光蛋白 1128

    方案5 用四环素调控基因表达建立细胞系 1131

    附加方案 有限稀释法筛选悬浮细胞的稳定克隆 1138

    信息栏 1140

    第18章 RNA干扰与小RNA分析 1170

    导言 1171

    方案1 双链siRNA制备 1185

    方案2 通过转染双链siRNA在哺乳动物细胞中进行RNA干扰 1187

    方案3 通过转染双链siRNA在果蝇S2细胞中进行RNA干扰 1190

    方案4 体外转录法制备dsRNA 1192

    方案5 采用dsRNA浸泡果蝇S2细胞进行RNA干扰 1196

    方案6 采用dsRNA转染在果蝇S2细胞中进行RNA干扰 1198

    方案7 小RNA的Northern杂交分析 1199

    方案8 反转录定量PCR分析小RNA 1203

    方案9 构建小RNA高通量测序文库 1206

    方案10 抑制miRNA功能的反义寡核苷酸制备 1215

    方案11 在哺乳动物细胞中通过反义寡核苷酸抑制miRNA功能 1216

    方案12 在果蝇S2细胞中通过反义寡核苷酸抑制miRNA功能 1218

    信息栏 1219

    第19章 克隆基因的表达以及目的蛋白的纯化和分析 1225

    导言 1226

    方案1 在大肠杆菌中利用可用IPTG诱导的启动子表达克隆化基因 1249

    附加方案 目标蛋白可溶性表达的小量试验 1255

    替代方案 在大肠杆菌中利用阿拉伯糖BAD启动子表达克隆基因 1260

    替代方案 信号肽融合虽白的亚细胞定位 1261

    方案2 用杆状病毒表达系统表达克隆基因 1265

    附加方案 噬菌斑测定法确定杆状病毒原液的滴度 1271

    替代方案 用于转染昆虫细胞的杆粒DNA制备 1274

    方案3用 甲醇诱导启动子AOX1在毕赤酵母中表达克隆基因 1277

    附加方案 酵母培养物的冻存 1287

    方案4 用于纯化大肠杆菌中表达可溶性蛋白的细胞提取物的制备 1291

    附加方案 酵母细胞玻璃珠裂解法 1296

    替代方案 温和的热诱导的酶裂解法制备大肠杆菌细胞提取物 1298

    替代方案 用溶菌酶裂解和冻融法联用制备大肠杆菌细胞提取物 1300

    方案5 采用固化的金属亲和层析纯化多聚组氨酸标记的蛋白质 1302

    附加方案 Niz+-NTA树脂的清洗与再生 1309

    替代方案 组氨酸标签蛋白的快速液相色谱纯化 1310

    方案6 采用谷胱甘肽树脂以亲和层析纯化融合蛋白 1314

    方案7 包含体中表达蛋白的增溶 1321

    方案8 蛋白质的SDS-PAGE 1325

    替代方案 用考马斯亮蓝进行SDS-PAGE凝胶染色的各种不同方法 1335

    替代方案 用银盐进行SDS-PAGE凝胶染色 1336

    方案9 蛋白质的免疫印迹分析 1340

    方案 10测定蛋白质浓度的方法 1347

    信息栏 1353

    第20章 利用交联技术分析染色质结构与功能 1358

    导言 1359

    方案1 甲醛交联 1369

    方案2 制备用于染色质免疫沉淀的交联染色质 1371

    方案3 染色质免疫沉淀(ChIP) 1373

    方案4 染色质免疫沉淀-定量聚合酶链反应( ChIP-qPCR) 1377

    方案5 染色质免疫沉淀-芯片杂交(ChIP-chip) 1378

    方案6 染色质免疫沉淀-高通量测序(ChIP-seq) 1385

    方案7 交联细胞3C文库的制备 1389

    方案8 环形染色质免疫沉淀(ChIP-loop)文库的制备 1393

    方案9 连接产物对照组文库的制备 1398

    方案10 PCR检测3C、ChIP-loop和对照文库中的3C连接产物:文库滴定与相互作用频率分析 1400

    方案11 3C、ChIP-loop和对照组文库的4C分析 1404

    方案12 3C、ChIP-loop和对照组文库的5C分析 1408

    信息栏 1412

    第21章 紫外交联免疫沉淀(CLIP)技术进行体内RNA结合位点作图 1415

    导言 1416

    方案1 CLIP实验免疫沉淀严谨性的优化 1424

    方案2 活细胞的紫外交联和裂解物制备 1429

    方案3 RNA酶滴定、免疫沉淀及SDS-PAGE 1432

    方案4 3'-接头的连接祁用SDS-PAGE进行大小选择 1441

    替代方案 去磷酸化RL3接头5端的标记 1445

    方案5 RNA标签的分离、5二接头的连接和反转录PCR扩增 1446

    方案6 RNA CLIP标签测序 1456

    方案7 RNA接头胶回收及保存 1458

    信息栏 1460

    第22章 Gateway相容酵母单杂交和双杂交系统 1464

    导言 1465

    方案1 构建酵母单杂交DNA-诱饵菌株 1474

    替代方案 用复性引物从DNA诱饵中获得入门克隆产物 1481

    方案2 生成酵母双杂交DB-诱饵菌株 1484

    方案3 从活化域捕获文库中鉴定相互作用分子 1490

    方案4 高效的酵母转化 1496

    方案5 用于B-半乳糖苷酶活力的菌落转移比色测定 1500

    方案6 酵母克隆的PCR 1502

    信息栏 1504

    附录1 试剂和缓冲液 1507

    附录2 常用技术 1533

    附录3 检测系统 1541

    附录4 一般安全原则和危险材料 1565

    索引 1573

    史上最全生物学实验技术

    核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。核酸提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。

    载体的构建原理:依赖于限制性核酸内切酶,DNA连接酶和其它修饰酶的作用,分别对目的基因和载体DNA进行适当的切割和修饰后,将二者连接在一起,导入宿主细胞,实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。

    今天小医给大家推送的是分子实验技术资源包不仅较详细地阐述了有关分子实验技术的具体操作和程序,对各种技术的基本原理及其相关理论基础进行深层次的剖析。

    课程内容:

    《载体的构建和鉴定》相关实验放送

    1、常用载体

    2、克隆载体构建

    3、表达载体构建

    4、慢病毒载体

    5、腺病毒载体

    6、融合蛋白表达载体构建的设计与质粒提取与分析

    《核酸提取技术》相关实验

    1、DNA提取

    2、 q-PCR

    3、RNA提取

    4、普通PCR

    5、实时荧光定量PCR(real time-QPCR)

    6、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)

    《差异基因表达谱分析技术》

    1、基因测序技术培训教程(基因组)

    2、基因测序技术培训教程(转录组)

    3、基因芯片

    4、基因组学与蛋白质组学

    《细菌转化与细胞转染技术》

    1、细胞转染

    2、细菌转化

    3、siRNA转染操作视频(操作视频+课件)

    4、细菌转化-电穿孔法原理及操作视频

    《外源基因表达鉴定技术》

    1、ELISA技术

    2、Northern Blot技术

    3、RT-PCR技术

    4、Western Blot技术

    5、酶联接免疫吸附测定(ELISA)(视频+课件)

    6、免疫印迹法(Western blotting)(视频+课件)

    《蛋白质-核酸相互作用技术》

    1、凝胶迁移实验

    2、CHIP染色质免疫共沉淀实验方法简介

    3、蛋白质—核酸相互作用

    4、凝胶迁移实验(EMSA)(视频+课件)

    5、染色质免疫沉淀技术(ChIP)(视频+课件)

    《蛋白质相互作用技术》

    1、GST沉降技术

    2、酵母双杂交技术

    3、免疫共沉淀技术

    4、细胞共定位技术

    《报告基因分析技术》

    1、体内报告基因实验

    2、体外报告基因实验

    《基因重组+敲除+打靶技术》

    1、基因重组技术

    2、基因打靶技术

    3、基因敲除

    4、基因克隆和DNA分析

    5、转基因动物技术

    《干细胞分离培养与纯化技术》

    1、肿瘤干细胞培养技术合辑

    2、肿瘤干细胞分离与鉴定

    3、全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(视频+课件)

    4、人胚胎干细胞分离培养与纯化

    5、人造血干细胞分离培养与纯化

    6、小鼠间充质干细胞分离培养与纯化

    7、干细胞基础

    8、人胎盘来源间充质干细胞分离培养与纯化

    《小RNA基因编辑技术》

    1、miRNA克隆+miRNA RT-PCR+miRNA qPCR引物设计

    2、miRNA Northern Blot

    3、miRNA原位杂交

    4、miRNA功能筛选鉴定

    5、miRNA靶基因鉴定

    6、siRNA实验

    《非编码RNA数据库及在线分析工具》

    1、miRNA-lncRNA关系预测数据库

    2、miRNA靶基因预测数据库

    3、miRNA相关数据库

    4、rRNA相关数据库

    5、siRNA相关数据库

    6、snoRNA相关数据库

    7、sRNA相关数据库

    8、tRNA相关数据库

    分子生物学实验技术高清操作高清视频教程+课件

    1、DNA甲基化检测

    2、分子克隆技术

    3、高分辨熔解曲线分析技术(HRM)

    4、原位杂交

    细胞实验技术高清操作视频教程+课件

    1、大鼠骨骼肌细胞培养

    2、细胞传代

    3、细胞冻存

    4、细胞复苏

    5、细胞划痕

    6、细胞侵袭

    7、组织块贴壁法培养大鼠平滑肌细胞

    蛋白检测实验技术高清教程+课件

    1、TUNEL法检测细胞凋亡

    2、免疫组化(IHC)

    零基础精通分子生物学实验技术

    1、现代分子生物学技术及实验技巧

    2、精编分子生物学实验指南

    3、分子克隆实验指南第4版(上册)

    4、分子克隆实验指南第4版(中册)

    5、分子克隆实验指南第4版(下册)

    分子克隆实验指南版截图