（第三册）临检室作业指导书 .doc
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临检室作业指导书
文件编号：ABCD-3-LJ-01~50
第A版
编制：
审核：
批准：
生效日期：2006年8月8日
ABCD人民医院检验科
目 录
序号主 题 内 容 代 号 页 号1血红蛋白电泳检查(电泳法)ABCD-3-LJ-0152精液常规检查ABCD-3-LJ-0293粪便常规检查(直接涂片法)ABCD-3-LJ-03124粪便潜血试验定性(纸片法)ABCD-3-LJ-04145尿沉渣检查(UD-S仪器法)ABCD-3-LJ-05166血疟原虫(MP)厚血片检查法ABCD-3-LJ-06217血疟原虫(MP)薄血片检查法ABCD-3-LJ-07238尿人绒毛膜促性腺激素定性ABCD-3-LJ-08259阴道分泌物常规检查ABCD-3-LJ-092710一小时尿沉渣计数ABCD-3-LJ-102911Xt2000i红细胞计数ABCD-3-LJ-113112Xt2000i白细胞检验ABCD-3-LJ-123313Xt2000i白细胞分类计数ABCD-3-LJ-133614Xt2000i血红蛋白检测ABCD-3-LJ-143915全血血细胞沉降率测定ABCD-3-LJ-154116Xt2000i红细胞比积的测定ABCD-3-LJ-164317Xt2000i平均红细胞体积检测ABCD-3-LJ-174618Xt2000i血小板(PLT)测定ABCD-3-LJ-184819红细胞平均血红蛋白含量测定ABCD-3-LJ-195120红细胞平均血红蛋白浓度测定ABCD-3-LJ-205321尿液酸碱度测定(干法学法)ABCD-3-LJ-215522尿葡萄糖定性实验(干化学法)ABCD-3-LJ-225823尿蛋白定性测定(干法学法)ABCD-3-LJ-236124尿血红蛋白测定(干化学法)ABCD-3-LJ-246425尿胆原定性测定(干法学法)ABCD-3-LJ-256726脑脊液蛋白定性试验(潘氏法)ABCD-3-LJ-267027脑脊液外观检查(目测法)ABCD-3-LJ-277328脑脊液有形成分检查(显微镜法)ABCD-3-LJ-287529尿亚硝酸盐定性测定(干法学法ABCD-3-LJ-297930凝血酶原时间(PT)测定ABCD-3-LJ-308131活化部分凝血活酶时间测定ABCD-3-LJ-318532凝血酶时间(TT)测定ABCD-3-LJ-328933血浆纤维蛋白原(Fbg)测定ABCD-3-LJ-339334骨髓巨核细胞计数ABCD-3-LJ-349735过氧化物酶染色(Washburn法)ABCD-3-LJ-359936糖原染色(Schiff法)ABCD-3-LJ-3610137中性粒细胞碱性磷酸酶染色ABCD-3-LJ-3710338尿微量白蛋白定量ABCD-3-LJ-3810539全血C-反应蛋白定量ABCD-3-LJ-3911040尿乳糜定性检查ABCD-3-LJ-4011441前列腺液常规检查(玻片法)ABCD-3-LJ-4111642血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间ABCD-3-LJ-4211743异常白细胞检查(显微镜法)ABCD-3-LJ-4311944异常红细胞检查(显微镜法)ABCD-3-LJ-4412345浆膜腔积液粘蛋白定性检查ABCD-3-LJ-4512846浆膜腔积液化学检查ABCD-3-LJ-4613147浆膜腔积液外观检查(目测法)ABCD-3-LJ-4713448浆膜腔积液有形成分检查ABCD-3-LJ-4813649血球分析仪操作维护规程ABCD-3-LJ-4913950血球分析仪操作手册ABCD-3-LJ-50143
修 订 页
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血红蛋白电泳检查(电泳法)
1. 原理
血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。本实验在碱性(PH=8.60)条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血
2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。清洁试管中，充分混匀。
4. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
5. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
6. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
7. 试剂
7.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂
7.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司
7.3 包装规格：150tests
7.4 试剂盒组成
琼脂糖凝胶 10块 溶血素 1瓶
缓冲液条带 10包×2条 薄滤纸 1×10张
氨基黑(浓缩液)1瓶×100ml 点样模具滤纸 10条×1盒
7.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温(15～30℃)或冰箱(2～8℃)，不能冷冻。有效期两年。
8. 仪器设备
8.1 仪器名称：SEBIA电泳仪
8.2 仪器厂家：法国Sebia公司
8.3 仪器型号：HYDRASYS
9. 操作步骤
9.1 血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm，5分钟，去掉血浆，用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul，需特别小心。取10ul红细胞加入130ul溶血液造成溶血。震荡混匀10秒钟，室温下培育5分钟待测。
9.2 启动电泳仪
9.3 将加样器放在一平板上，有数字的一端向上。各加样孔加入10ul溶血的样品，2分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内，齿端向上(转运时用塑料齿保护架)。等待5分钟，使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖，抬起电极和加样器支架。
9.4 使用HYDRAGEL 15 HEMOGLOBINCE时选择仪器的"HBTOTAL"程序(位于链盘左侧)。
9.5 从包装袋内取出缓冲条，拿出末端的塑料片 ......
临检室作业指导书
文件编号：ABCD-3-LJ-01~50
第A版
编制：
审核：
批准：
生效日期：2006年8月8日
ABCD人民医院检验科
目 录
序号主 题 内 容 代 号 页 号1血红蛋白电泳检查(电泳法)ABCD-3-LJ-0152精液常规检查ABCD-3-LJ-0293粪便常规检查(直接涂片法)ABCD-3-LJ-03124粪便潜血试验定性(纸片法)ABCD-3-LJ-04145尿沉渣检查(UD-S仪器法)ABCD-3-LJ-05166血疟原虫(MP)厚血片检查法ABCD-3-LJ-06217血疟原虫(MP)薄血片检查法ABCD-3-LJ-07238尿人绒毛膜促性腺激素定性ABCD-3-LJ-08259阴道分泌物常规检查ABCD-3-LJ-092710一小时尿沉渣计数ABCD-3-LJ-102911Xt2000i红细胞计数ABCD-3-LJ-113112Xt2000i白细胞检验ABCD-3-LJ-123313Xt2000i白细胞分类计数ABCD-3-LJ-133614Xt2000i血红蛋白检测ABCD-3-LJ-143915全血血细胞沉降率测定ABCD-3-LJ-154116Xt2000i红细胞比积的测定ABCD-3-LJ-164317Xt2000i平均红细胞体积检测ABCD-3-LJ-174618Xt2000i血小板(PLT)测定ABCD-3-LJ-184819红细胞平均血红蛋白含量测定ABCD-3-LJ-195120红细胞平均血红蛋白浓度测定ABCD-3-LJ-205321尿液酸碱度测定(干法学法)ABCD-3-LJ-215522尿葡萄糖定性实验(干化学法)ABCD-3-LJ-225823尿蛋白定性测定(干法学法)ABCD-3-LJ-236124尿血红蛋白测定(干化学法)ABCD-3-LJ-246425尿胆原定性测定(干法学法)ABCD-3-LJ-256726脑脊液蛋白定性试验(潘氏法)ABCD-3-LJ-267027脑脊液外观检查(目测法)ABCD-3-LJ-277328脑脊液有形成分检查(显微镜法)ABCD-3-LJ-287529尿亚硝酸盐定性测定(干法学法ABCD-3-LJ-297930凝血酶原时间(PT)测定ABCD-3-LJ-308131活化部分凝血活酶时间测定ABCD-3-LJ-318532凝血酶时间(TT)测定ABCD-3-LJ-328933血浆纤维蛋白原(Fbg)测定ABCD-3-LJ-339334骨髓巨核细胞计数ABCD-3-LJ-349735过氧化物酶染色(Washburn法)ABCD-3-LJ-359936糖原染色(Schiff法)ABCD-3-LJ-3610137中性粒细胞碱性磷酸酶染色ABCD-3-LJ-3710338尿微量白蛋白定量ABCD-3-LJ-3810539全血C-反应蛋白定量ABCD-3-LJ-3911040尿乳糜定性检查ABCD-3-LJ-4011441前列腺液常规检查(玻片法)ABCD-3-LJ-4111642血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间ABCD-3-LJ-4211743异常白细胞检查(显微镜法)ABCD-3-LJ-4311944异常红细胞检查(显微镜法)ABCD-3-LJ-4412345浆膜腔积液粘蛋白定性检查ABCD-3-LJ-4512846浆膜腔积液化学检查ABCD-3-LJ-4613147浆膜腔积液外观检查(目测法)ABCD-3-LJ-4713448浆膜腔积液有形成分检查ABCD-3-LJ-4813649血球分析仪操作维护规程ABCD-3-LJ-4913950血球分析仪操作手册ABCD-3-LJ-50143
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血红蛋白电泳检查(电泳法)
1. 原理
血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。本实验在碱性(PH=8.60)条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血
2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。清洁试管中，充分混匀。
4. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
5. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
6. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
7. 试剂
7.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂
7.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司
7.3 包装规格：150tests
7.4 试剂盒组成
琼脂糖凝胶 10块 溶血素 1瓶
缓冲液条带 10包×2条 薄滤纸 1×10张
氨基黑(浓缩液)1瓶×100ml 点样模具滤纸 10条×1盒
7.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温(15～30℃)或冰箱(2～8℃)，不能冷冻。有效期两年。
8. 仪器设备
8.1 仪器名称：SEBIA电泳仪
8.2 仪器厂家：法国Sebia公司
8.3 仪器型号：HYDRASYS
9. 操作步骤
9.1 血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm，5分钟，去掉血浆，用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul，需特别小心。取10ul红细胞加入130ul溶血液造成溶血。震荡混匀10秒钟，室温下培育5分钟待测。
9.2 启动电泳仪
9.3 将加样器放在一平板上，有数字的一端向上。各加样孔加入10ul溶血的样品，2分钟内加样完毕。将加样器放入保湿盒内，齿端向上(转运时用塑料齿保护架)。等待5分钟，使样品扩散至齿端。打开电泳仪盖，抬起电极和加样器支架。
9.4 使用HYDRAGEL 15 HEMOGLOBINCE时选择仪器的"HBTOTAL"程序(位于链盘左侧)。
9.5 从包装袋内取出缓冲条，拿出末端的塑料片 ......
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